目的:为探讨酒精暴露对于仔鼠脊髓前角及后角神经元是否造成损伤作用,展开了我们的初步研究。方法:将出生后4d小鼠随机分为两组,即对照(Control)组、酒精(Alcohol)组。酒精组根据体重比行酒精皮下注射,对照组则按体重比注射生理盐水,2h后重复一次;出生第6d相同时间按上述步骤再次注射,2h后解剖并留取完整脊髓组织,进行免疫组化染色、免疫荧光染色、Western Blot相关检测。另一部分小鼠待成年后进行相应检测。结果:1.酒精暴露可引起仔鼠脊髓Caspase 3阳性细胞显著增多(P<0.01),即脊髓神经元凋亡增强。免疫组化图片上显示脊髓前角、后角都存在相应的Caspase 3表达上调。免疫荧光图片显示酒精造成了PD6仔鼠神经元凋亡数量升高。2.酒精暴露可导致仔鼠脊髓前角Ch AT阳性神经元的数量下降及脊髓后角GAD67阳性神经元的数量减少,免疫荧光双标结果可知损伤的细胞类型为Ch AT阳性和GAD67阳性神经元,而免疫组化图片也表现了Ch AT、GAD67的分布区域。Western Blot结果表现出Ch AT、GAD67蛋白灰度值下降(P<0.05)。3.酒精暴露可引起仔鼠脊髓GFAP、Iba1表达上升,即酒精引起了仔鼠脊髓的炎症反应,胶质细胞呈活化状态。免疫组化图片中,酒精组脊髓弥漫分布了更密集的GFAP阳性神经元(P<0.05),而免疫荧光图片表现得更加明显(P<0.01)。Iba1的表达在免疫组化和免疫荧光图片中都显示出更为明显的增加(P<0.01)。4.酒精暴露可导致成年鼠脊髓神经元数量下降,如免疫组化图示(P<0.01)。5.酒精暴露可引起成年鼠脊髓前角Ch AT阳性神经元的平均面积减少(P<0.01)及脊髓后角GAD67阳性神经元的数量减少(P<0.01),Western Blot也有同样体现。6.酒精暴露可导致仔鼠和成年鼠脊髓SUFU、Shh、Islet1蛋白的表达下降(P<0.05)。结论:1.酒精引起仔鼠脊髓神经元凋亡,表现为胆碱能神经元、GABA能神经元的减少。2.酒精引起仔鼠脊髓炎症反应,胶质细胞增生。3.酒精引起成年鼠脊髓神经元数量减少,为胆碱能神经元、GABA能神经元减少。4.酒精引起的胆碱能神经元和GABA能神经元的发育障碍、数量减少可能与Sonic hedgehog信号通路的抑制及Islet1的表达下调有关。