舌癌(Carcinomaoftongue)是发生于舌粘膜的鳞状上皮的恶性肿瘤，是最常见的口腔癌。因舌体具有丰富的淋巴管和血液循环，加以舌的机械运动频繁，舌癌常发生于早期的颈淋巴结转移，而目前主要的治疗方法是手术治疗，但术后复发率高，常造成患者语言、进食、呼吸等基本生活功能障碍及颜面颈部畸型，严重影响患者生活质量和心理状态，对于舌癌的侵袭及复发及淋巴结转移机制仍未明确。但目前已经知道血管生成及癌周淋巴管的生成在肿瘤的生长和转移中起着重要作用。近年来，研究发现在众多实体肿瘤中可检测到诱导型一氧化酶(induciblenitricoxidesyntlaase，iNOS)和血管内皮生长因子-C(vascularendothelialgrowthfactor—C，VEGF-C)的过度表达，这两者在肿瘤的生长、转移过程中都有较强的促进血管形成和淋巴管形成的作用。 一氧化氮(nitricoxide，NO)是由一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase，NOS)催化底物左旋精氨酸合成的一种具有多种生物学活性的气体分子，它既具有第二信使和神经递质的功能，又是杀伤肿瘤细胞的效应分子。NOS有三种亚型，分别由不同的基因编码，即神经元型NOS(neuronalNOS，nNOS)，诱导型NOS(inducibleNOS，iNOS)和内皮型(endothelialNOS，eNOS)。其中iNOS在NO介导的肿瘤生长及淋巴结转移起主要作用，并在人体多种肿瘤组织中检测到它的过度表达。VEGF是一组分泌性糖蛋白，可调节血管发生，淋巴管生成及血管、淋巴管通透性。近年来研究发现VEGF家族成员之一VEGF—C通过与其受体VEGFR-3结合，在肿瘤淋巴结转移中发挥重要作用。 近年来，VEGF—C和iNOS在肿瘤发生转移发展过程中的作用已受到关注，并在多种肿瘤中表达上调，在目前国内外文献中对舌癌及淋巴转移中iNOS和VEGF-C的表达情况及相互间联系的研究尚少见报道。 研究目的： 本研究应用免疫组织化学法检测iNOS、VEGF—C在舌癌中的表达情况，揭示iNOS、VEGF—C的相互关系及其和微淋巴管密度(LVD)以及舌癌临床病理特征之间的关系，探讨两者在舌癌发生发展及淋巴转移过程中的作用及两者之间可能存在的相互作用机制，为舌癌的抗淋巴转移的治疗提供理论基础。 材料和方法： 1、标本收集 收集自2000—2007年在中山二院手术切除的舌癌标本60例，患者术前未经任何治疗。 2、实验方法 用S—P免疫酶染色法检测iNOS，VEGF-C。 3、结果判断 所有切片均经过病理科医生协助观察，细胞的胞浆或者胞核内出现棕黄色颗粒为阳性，细胞核着蓝色为阴性。iNOS和VEGF-C的结果判断根据高倍镜下阳性细胞所占比例及着色强度综合制定免疫组化半定量记分。按Weidner法进行微淋巴密度计数，计算3个200倍视野淋巴管的总数作为该例的LVD值。 4、统计分析 计数资料采用x2检验或精确概率法比较两组或多组间阳性率的差别。计量资料分别采用t检验和单因素方差分析进行两组与多组之间样本均数的比较。P<0.05，差异有统计学意义。P<0.01为差异有明显差异性。上述检验均采用SPSS11.0统计软件进行统计学分析。 结果： 1、iNOS、VEGF—C在舌癌中的表达 iNOS在正常舌组织、无淋巴结转移舌癌、有淋巴结转移舌癌的阳性表达率分别为：0、26.67％、53.33％，P<0.05，各组间的差异有统计学意义；VEGF—C在正常舌组织、无淋巴结转移舌癌、有淋巴结转移舌癌中的阳性表达率分别为0、30.00％、63.33％，P<0.05，各组间差异有统计学意义；正常舌组织、无淋巴结转移舌癌、有淋巴结转移舌癌中的LND计数分别为1.0、16.43、25.86，P<0.05，差异有统计学意义。 2、iNOS、VEGF—C和LND的关系 24例iNOS阳性表达的舌癌中微淋巴管密度为20.50±2.50，36例iNOS阴性表达的舌癌中微淋巴管密度为13.40±3.30，P<0.05，差异有统计学意义。28例VEGF-C阳性表达的舌癌中微淋巴管密度为27.60±3.50，32例VEGF—C阴性表达的舌癌中微淋巴管密度为16.80±3.70，P<0.05，差异有统计学意义。 3、iNOS、VEGF—C与舌癌临床病理特征的关系 iNOS表达与舌癌大小，临床分期，等临床病理特征无关，与转移有关；VEGF—C表达与舌癌大小，临床分期等临床病理特征无关，与转移有关。 4、iNOS与VEGF—C在舌癌中表达的相关性 iNOS与VEGF—C在舌癌中表达的相关性经过Spearman检验，相关系数0.668，P<0.05，两者呈正相关。 结论： 1、iNOS有促进舌癌癌周淋巴管形成的作用，且与舌癌的淋巴转移有密切的关系。 2、VEGF—C有促进舌癌癌周淋巴管形成的作用，且与舌癌的淋巴转移有密切的关系。 3、iNOS与VEGF—C有着密切的关联性，VEGF—C水平和iNOS活性，以及与淋巴结转移的出现之间正相关性。可能有在正反馈调节机制。VEGF—C及iNOS也有望成为舌癌诊疗中的重要靶点。