曲安奈德对缺氧损伤人视网膜色素上皮细胞表达VEGF的影响

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目的:研究缺氧损伤的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium。hRPE)细胞表达血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的变化情况及曲安奈德(triamcinolone acetonide,TA)对其表达的影响。方法:体外培养人视网膜色素上皮细胞株,建立hRPE细胞氯化钴化学缺氧模型。实验分为正常对照组、缺氧损伤组、TA处理组,其中TA处理组根据曲安奈德浓度不同(①0.05mg/ml,②0.1mg/ml,③0.2mg/m1)分为三个亚组。采用比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率,采用免疫细胞化学方法、逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达变化。结果:1、hRPE细胞(hRPE-D407细胞株)以长梭形或多边形为主,单层贴壁生长,胞核透亮,胞浆丰富,细胞边界清楚。2、细胞免疫化学技术结果显示VEGF在正常的人视网膜色素上皮细胞中有少量表达,缺氧损伤后其表达水平升高,与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。3、TA处理组的三个亚组LDH释放率分别59.49+7.87,49.45±6.83,40.34±3.92,VEGF蛋白灰度值分别为134.34±4.42,137.77±6.43,142.97±6.31,VEGFmRNA相对表达量分别为0.74±0.04,0.68±0.04,0.52±0.05,与缺氧损伤组LDH释放率(69.2±5.18)、VEGF蛋白灰度值(131.62±3.05)、VEGFmRNA相对表达量(0.85±0.04)比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:VEGF在缺氧损伤的人视网膜色素上皮细胞中表达增强;曲安奈德可以抑制VEGF的表达和降低LDH的释放率,对hRPE细胞的缺氧损伤发挥一定保护作用。
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