叶酸偶联金纳米棒在VX-2肝癌模型组织分布情况及其联合125I粒子诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yifanjiawei
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目的:本文通过建立一种以叶酸偶联二氧化硅包覆的金纳米棒探针,并建立VX-2兔肝癌模型,观察实验动物对叶酸偶联二氧化硅包覆的金纳米棒(GNRs@Si O2-FA)的摄取状况,检测GNRs@Si O2-FA对肝癌细胞的靶向性。探讨叶酸偶联金纳米棒联合125I粒子内放疗对兔VX2肝癌凋亡及其相关蛋白表达的影响。方法:以二氧化硅(SIO2)为外壳,利用种子生长法制备椭圆形二氧化硅包覆的金纳米棒(GNRs@SIO2),并将其氨基化与叶酸偶联,制得叶酸偶联二氧化硅包覆的金纳米棒(GNRs@Si O2-FA)。利用透视电镜和紫外光谱观察(GNRs@Si O2-FA)光学特性,利用MTT法检测其细胞毒性。动物实验中采用CT引导下穿刺接种法建立兔VX-2肝癌模型27只,行CT、超声检查观察肿瘤生长情况。2周后将实验动物随机分成三组,即空白对照组(注入生理盐水),门静脉注射组,瘤内直接注射组,在成功注射GNRs@Si O2-FA后24h、48h和72h每组3只兔肝癌模型分别被处死,并将模型的肿瘤组织和其他主要脏器取出,冰冻切片,采用双光子荧光共聚焦显微镜观察GNRs@Si O-FA在实验动物体内分布情况。相同操作方法建立兔VX-2肝癌模型24只。2周后将实验动物随机分成空心125I粒子对照组,金纳米棒治疗组,单纯125I粒子植入组,联合治疗组。应用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western Blot法检测bcl-2、bax、caspase-3蛋白表达情况。结果:MTT检测结果显示GNRs@Si O2-FA具有高度生物相容性,激光共聚焦显微镜观察表明GNRs@Si O2-FA对肿瘤细胞具有高度靶向性,在24h内即可特异性地与肿瘤细胞结合,并聚集在肿瘤细胞质内。在VX-2兔肝癌模型的肿瘤细胞凋亡率检测中,单纯金纳米棒组和单纯125I粒子照射的肝癌细胞凋亡率均组较空白对照组均有升高(P<0.05),联合组较单纯金纳米棒组和单纯125I粒子照射组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Western Blot示联合治疗组较其他三组凋亡相关蛋白bax、caspase-3明显上调,bcl-2明显下调(P<0.05)。结论:GNRs@Si O-FA可以在VX-2兔肝癌模型体内可以快速识别肝癌细胞并特异性与肿瘤细胞结合,GNRs@Si O2-FA联合125I粒子治疗肝癌,通过内放疗与热疗的协同作用,促进bax、caspase-3蛋白的表达并抑制bcl-2蛋白的表达,从而诱导肝癌细胞的凋亡达到治疗肝癌的目的。GNRs@Si O2-FA联合125I粒子热放疗治疗肿瘤,是一种新兴的肿瘤治疗方法,在肿瘤的主动靶向治疗和粒子介入治疗领域具有巨大的应用价值。
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