【摘 要】
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目的 观察角膜创伤愈合过程中,角膜上皮愈合情况及角膜纤维细胞活化增生情况;结缔组织生长因子(Connective Tissue Growth Factor,CTGF)及转化生长因子-β1(Transforming Growth
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目的 观察角膜创伤愈合过程中,角膜上皮愈合情况及角膜纤维细胞活化增生情况;结缔组织生长因子(Connective Tissue Growth Factor,CTGF)及转化生长因子-β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)、Ⅰ型胶原和纤维粘连蛋白(Fibronectin,FN)的表达,TGF、CTGF对角膜创伤愈合的作用,并对二者之间的相互作用及与此有关的Smad信号传导通路做初步的研究。 方法 随即选择Albino纯种白兔35只,空白对照组:2兔4眼。单纯角膜创伤组:又分术后2小时、6小时、1天、3天、7天、14天、21天组,每组随即4眼。TGF抗体组:颞侧球结膜下注射15.5μgTGF抗体(经预实验选择得到的浓度)又分为3天、7天、14天、21天组,每组随即4眼。Smad4抗体组:颞侧球结膜下注射20μgSmad4抗体;又分为3天、7天、14天、21天组,每组随即4眼。实验眼首先施一直径3毫米,包含0.05mm实质层的板层角膜切除术,TGF抗体组及Smad4抗体组术眼球结膜下注射TGF-β1抗体或smad4抗体。用免疫组化及mRNA原位杂交方法分别检测CTGF、TGF-β1、FN蛋白术后2小时、6小时、1天、3天、7天、14天、21天的表达及Ⅰ型胶原、CTGFmRNA在术后6h、3天、7天、21天的表达;角膜上皮愈合情况及角膜纤维细胞活化增生情况。免疫组化所检蛋白、mRNA原位杂交所检mRNA表达强度用组织学评分∑pi表示,其中p代表阳性细胞数所占计数细胞百分比,I代表细胞染色强度。P和I均划分为0、1、2、3分。∑pi为阳性细胞数量和着色强度两项得分相加所得结果。每个角膜选3个切片进行免疫组化或原位杂交染色,每张切片随机选取3个视野(×400),共9个视野,分析结果进行
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