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目的：联氨基姜黄素（hydrazinocurcumin,HC）是一种化学合成的姜黄素衍生物，可抑制肿瘤的发生、发展和转移，但其生物利用度低，限制了在体内的应用。本课题采用脂质体纳米载药颗粒包裹联氨基姜黄素，研究联氨基姜黄素脂质体纳米颗粒（HC-NPs）对乳腺癌细胞的抗肿瘤效应及其作用机制，为进一步的体内应用研究奠定基础。此外，鉴于Stat3是影响乳腺癌发生、发展的重要信号分子，我们采用抗菌肽PR39携运Stat3siRNA，体外作用小鼠乳腺癌4T1细胞，研究PR39携运siRNA的可行性和有效性，并探讨PR39/Stat3siRNA对乳腺癌细胞侵袭转移的影响及其作用机制。方法：1.以薄膜分散-超声法制备HC-NPs，利用透射电镜观察颗粒的粒径分布和形态；荧光显微镜观察纳米颗粒纳入细胞情况。2.HC-NPs体外对乳腺癌细胞生长影响及其机制：MTT法检测HC-NPs对MDA-MB-231、4T1细胞增殖的影响；刘氏染色观察细胞形态学改变；FCM法检测乳腺癌细胞的增殖周期和凋亡率；Transwell法检测乳腺癌细胞侵袭和迁移的变化；Westernb lotting法检测与细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移相关蛋白CyclinD1、Bcl-2、Bax、Survivin、MMP-9的表达变化。3.PR39/Stat3siRNA体外对乳腺癌细胞侵袭迁移的抑制作用及其机制：荧光显微镜观察FITC-PR39/Cy3-siRNA的细胞内定位；MTT法检测PR39/Stat3siRNA复合物对4T1细胞增殖的影响；Transwell法检测细胞侵袭和迁移的变化；RT-PCR法和Western blotting法分别检测Stat3及侵袭迁移相关基因MMP-9表达水平的变化。结果：1.成功制备了HC-NPs，透射电镜下为150nm左右的圆形颗粒，粒径分布为(158±11)nm。荧光显微镜观察颗粒与细胞共孵育1h即能纳入细胞内，在4h达高峰。2.HC-NPs处理人乳腺癌MDA-MB-231和小鼠乳腺癌4T1细胞后，与脂质体纳米颗粒空载（NPs）对照组相比，可明显抑制细胞的增殖，两种乳腺癌细胞均出现形态变圆，少数细胞内出现空泡或碎裂；FCM法检测HC-NPs处理后，MDA-MB-231和4T1细胞G2/M期比例较PBS组和脂质体纳米颗粒非载药组明显增加(P<0.01)，且HC-NPs处理组细胞凋亡率比对照组显著增多(P<0.01)；Transwell法检测到HC-NPs处理后，两种乳腺癌细胞的侵袭能力和迁移能力明显降低(P<0.01)；Westernblotting检测结果显示，HC-NPs处理组与对照组相比p-Stat3、CyclinD1、c-Myc、MMP-9、Bcl-2、Survivin蛋白表达显著降低，Bax表达明显增加，总Stat3水平无明显差异。3.Stat3siRNA/PR39复合物转染小鼠乳腺癌4T1细胞的最佳比例为1：90，半定量RT-PCR、Western blotting结果显示，PR39/Stat3siRNA转染组细胞的Stat3和MMP-9基因的mRNA及蛋白表达水平明显低于对照组，但转染效率稍低于脂质体2000阳性对照组；MTT实验、FCM检测结果显示，Stat3siRNA转染组细胞的增殖和细胞周期无明显变化，而Transwell检测结果显示，单用PR39可降低4T1细胞的侵袭和迁移作用，并可协同Stat3siRNA显著抑制4T1细胞的侵袭和迁移。结论：1.HC-NPs可明显抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭及迁移，并可诱导细胞凋亡，其机制可能与降低p-Stat3的表达，下调JAK/STAT信号通路下游与乳腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭迁移相关蛋白分子的表达有关。因此，联氨基姜黄素脂质体纳米颗粒作为一种新的载药系统，具有良好的应用前景。2.PR39可成功携运Stat3siRNA转染乳腺癌4T1细胞，并有效降低Stat3的表达，从而抑制乳腺癌细胞的侵袭迁移；研究结果还显示，尽管PR39/Stat3siRNA转染效率低于脂质体2000阳性对照组，但PR39可协同Stat3siRNA显著抑制4T1细胞的侵袭和迁移，其抑制细胞的侵袭迁移能力明显较脂质体2000组增强，为siRNA载体的选择提供了新选择。