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研究背景和研究目的:福莫特罗(Formoterol,FOR)是较常用的长效β2受体激动剂(long-acting beta 2 agonists,LABA),在临床上常用于治疗哮喘(asthma)、慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary diseases,COPD)等气道阻塞性疾病。环索奈德(Ciclesonide,CIC)是一种具有高效局部抗炎作用的吸入性糖皮质激素,主要用于治疗哮喘。有研究表明福莫特罗与环索奈德联用能产生协同作用,具有更好的临床治疗效果。本实验从整体试验和离体试验两方面研究环索奈德协同增强福莫特罗扩张支气管的作用及机制。方法:1.整体试验建立组胺(Histamine)诱导的豚鼠支气管收缩反应模型,测定豚鼠的气道阻力(RL)和动态肺顺应性(Cdyn),评价环索奈德、福莫特罗以及环索奈德与福莫特罗联用对组胺诱导的豚鼠支气管收缩反应的抑制作用强度。2.离体试验1)离体气管平滑肌舒张试验:取豚鼠气管制成气管片,用卡巴胆碱(carbarchol,CCh)诱导豚鼠离体气管平滑肌收缩,用Medlab生物采集系统分别记录在环索奈德、福莫特罗以及环索奈德与福莫特罗联用孵育条件下对豚鼠气管平滑肌收缩反应的抑制强度。2)离体气管平滑肌环磷酸腺苷(cAMP)测定:处死豚鼠取出气管后,称取200g气管,用环索奈德、福莫特罗以及环索奈德与福莫特罗联用药物孵育,然后提取cAMP,使用ELISA试剂盒检测cAMP含量,观察药物对豚鼠离体气管cAMP释放的影响。结果:1.对组胺引起的豚鼠支气管收缩的抑制作用:比较福莫特罗+环索奈德联用与福莫特罗或环索奈德单用的作用强度1)与空白组相比,福莫特罗(9μg/kg)或环索奈德(0.6 mg/kg)单药可明显抑制组胺引起的支气管收缩反应,表现为一致豚鼠肺顺应性的下降和气道阻力的增加(p<0.001-0.05)。2)与空白组相比,福莫特罗(9μg/kg)与环索奈德(0.6 mg/kg)联用明显抑制组胺引起的肺顺应性的下降和气道阻力的增加(p<0.001-0.05),与福莫特罗组相比,联合用药组在组胺浓度达到1 mg/mL和2 mg/mL时,其抑制气道阻力的增加和肺动态顺应性的减少的作用开始明显强于福莫特罗组,统计学有显著性差异(p<0.001-0.05),与环索奈德组相比,在组胺浓度为0.5、1、2mg/mL时,联合给药组抑制豚鼠肺动态顺应性的减少的效果明显强于环索奈德组(p<0.001-0.05),在组胺浓度为1.2 mg/mL时,联合给药组抑制豚鼠气道阻力的增加的效果也明显强于环索奈德组(p<0.001-0.05)。2.离体试验结果2.1对卡巴胆碱诱导的气管平滑肌收缩的舒张作用:比较福莫特罗+环索奈德联用与福莫特罗或环索奈德单用的作用强度1)卡巴胆碱诱导的气管平滑肌最大收缩反应,然后加受试药物观察其松弛作用。环索奈德单药对卡巴胆碱引起的气管平滑肌的收缩无明显松弛效果(p>0.05),而福莫特罗单药呈剂量依赖性地松弛卡巴胆碱引起的气管平滑肌收缩反应(p<0.001)。2)与空白组相比,联合给药组有明显的松弛作用(p<0.001),且效果明显强于环索奈德组(p<0.001),与福莫特罗组比较,在药物浓度达到3 × 10-6mol/L和10-5mol/L时,联合用药作用明显的强于福莫特罗(p<0.001～0.05)。2.2对豚鼠气管平滑肌cAMP水平的影响:比较福莫特罗+环索奈德联用与福莫特罗或环索奈德单用的作用强度1)与空白组相比,环索奈德单药对豚鼠气管平滑肌cAMP水平无明显影响(p>0.05),而福莫特罗明显增加豚鼠气管平滑肌cAMP水平(p<0.01)。2)与空白组相比,联合给药组明显提升了豚鼠气道平滑肌的cAMP水平(p<0.001);此外,联合给药组增加豚鼠气道平滑肌cAMP水平也明显强于环索奈德组(p<0.01～0.05)和福莫特罗组(p<0.05)。结论:1)环索奈德协同增强福莫特罗对组胺诱导的豚鼠支气管收缩的保护作用;2)环索奈德协同增强福莫特罗对卡巴胆碱诱导的豚鼠离体气管平滑肌收缩的舒张作用;3)环索奈德协同增强福莫特罗对豚鼠气管平滑肌cAMP水平升高作用。4)两药联合应用舒张支气管平滑肌的协同作用机制主要通过升高平滑肌cAMP水平。