TLR3在HBsAg阳性孕妇婴儿HBV宫内感染中作用机制的研究

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目的①了解HBsAg阳性孕妇婴儿脐静脉血PBMC中TLR3与HBV宫内感染的关系。②探讨HBsAg阳性孕妇婴儿脐静脉血PBMC中相关免疫细胞与HBV宫内感染的关系。③探讨TLR3在HBsAg阳性孕妇婴儿HBV宫内感染中可能的作用机制。方法①收集2011年7月至2012年1月于太原市传染病医院妇产科分娩的HBsAg阳性孕妇产后脐血共52例。无菌采集分娩时脐血抗凝血30ml,并收集母儿的流行病学资料。②婴儿脐静脉血PBMC的分离及培养,体外HBV干预宫内感染组和非宫内感染组,以HBV+PolyI:C干预宫内感染组婴儿PBMC。③多色流式细胞术(FCM)对两组TLR3蛋白表达的荧光强度值以及T细胞、B细胞、DC细胞和CD4+CD25+Treg的百分比进行测定。结果①采用多色FCM测定TLR3蛋白表达荧光强度值,经比较:非宫内感染组的TLR3蛋白表达的平均荧光强度值(32.18±11.36)高于宫内感染组(30.29±11.04),差异无统计学意义(t=0.410,P=0.684);宫内感染组TLR3活化后(即PolyI:C刺激后),TLR3蛋白表达的平均荧光强度值(32.16±9.40)升高,与非宫内感染组的(32.18±11.36)相比,无统计学差异(t=-1.824,P=0.078)。②采用多色FCM测定B细胞的百分比,经比较:非宫内感染组的B细胞的百分比(7.38±6.40)高于宫内感染组(6.76±4.01),没有统计学差异(t=0.210,P=0.834);宫内感染组TLR3活化后,B细胞的百分比(5.14±2.64)降低,与非宫内感染组(7.38±6.40)比较,差异没有统计学意义(t=0.768,P=0.447)。③非宫内感染组的CD4+T细胞的百分比(41.14±20.08)高于宫内感染组(33.82±2.60),差异尚不能认为有统计学意义(t=0.618,P=0.543);非宫内感染组的CD8+T细胞的百分比(11.30±5.87)与宫内感染组(11.14±9.64)相比,差异无统计学意义(t=0.041,P=0.968);非宫内感染组的CD4+/CD8+比值(4.30±2.28)与宫内感染组的(4.75±3.23)比较,差异尚不能认为有统计学意义(t=-0.30,P=0.767)。④非宫内感染组的mDC的百分比(0.84±0.58)高于宫内感染组(0.67±0.34),差异尚不能认为有统计学意义(t=-0.485,P=0.633);非宫内感染组的pDC(0.92±0.91)与宫内感染组的(0.91±0.46)比较,差异没有统计学意义(t=0.020,P=0.984)。⑤非宫内感染组的CD4~+CD25~+Treg细胞的百分比(4.69±3.41)与宫内感染组(3.00)比较,差异无统计学意义(t=0.474,P=0.646)。结论①非宫内感染组的TLR3蛋白表达平均荧光强度值高于宫内感染组,而宫内感染组经PolyI:C刺激后其表达水平升高,提示宫内感染可能与婴儿TLR3表达有关。②非宫内感染组的B细胞、CD4~+T细胞、mDC的百分比高于宫内感染组,提示宫内感染与婴儿B细胞、CD4~+T细胞、mDC表达可能有关。③本次研究未发现宫内感染与CD8~+T细胞、pDC、CD4~+CD25+Treg细胞的百分比以及CD4~+/CD8~+比值相关,有待于进一步研究。
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