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背景 糖皮质激素抵抗是临床上包括哮喘在内的许多慢性炎症性疾病的治疗难题，而人类对激素抵抗的分子机制仍然还未完全研究清楚。越来越多的研究发现糖皮质激素受体beta亚型(hGR β)相对于alpha亚型(hGR α)的过度表达与激素抵抗密切相关。人糖皮质激素受体外显子9的选择性剪接产生两种高度同源的剪接异构体，hGR α和hGR β。在mRNA水平上，两者含有完全相同的前8个外显子，反映在氨基酸序列上，两者在氨基端有相同的727个氨基酸。唯一的差别在剩余的羧基端部分：hGR α的羧基端由外显子9α编码的50个氨基酸组成，而hGR β的羧基端由外显子9β编码的的15个非同源氨基酸组成。这些结构上的差别使得hGR β在功能上无法结合糖皮质激素，降低了与DNA结合的能力，使之丧失基因转录激活作用。在转染细胞中，过度表达的hGR β与hGR α形成异源二聚体从而抑制hGR α介导的的转录激活作用。因此hGR β被认为是hGR α功能的主要拮抗因子。 富含丝氨酸／精氨酸的蛋白(SR protein)和hnRNPA1是真核生物中重要的剪接因子。它们在剪接位点的识别，外显子保留，以及剪接位点的相互作用上发挥着重要的作用，因而成为研究前体mRNA选择性剪接的重要候选因子。 考虑到hGR β与激素抵抗密切关系，因此研究糖皮质激素受体前体mRNA外显子9的选择性剪接机制，找到决定hGR β剪接的关键因素对于揭开激素抵抗的分子机制具有重要意义，并能为激素抵抗的临床治疗提供可能的靶点。尽管有研究报道SR蛋白成员SRp30c对hGR β的选择性剪接具有决定性作用，但大量hGR外显子9选择性剪接的调控机制仍不为人所知。 目的 1．构建hGR小基因报告载体，为进一步研究糖皮质激素受体外显子9的选择性剪接提供分子模型。