论文部分内容阅读
目的：将汉防己甲素（Tetrandrine，TET）制备成干粉吸入剂，与化疗药物顺铂联合使用，达到对肺癌化疗增敏的目的。并对其制剂学、增敏的机制进行相关研究。方法：（1）建立汉防己甲素干粉吸入剂（TET-DPI）的质量评价体系，包括汉防己甲素的HPLC含量测定法和干粉剂的体外评价，即粉末的理化性质（形态、粒径大小及分布、引湿性、流动性等）和雾化能力（排空率、体外沉积率）的考察。（2）采用喷雾干燥法制备汉防己甲素微粉，向处方中加入常用的制剂辅料作为载体制备干粉剂，并以粉末的排空率和体外沉积率为主要评价指标，通过单因素的考察优化处方。（3）在体外增敏机制的的研究中，以人非小细胞肺癌A549和耐顺铂细胞株A549/DDP为研究对象。汉防己甲素微粉与顺铂联合用药，利用MTT法、细胞凋亡及细胞周期的测定方法，考察汉防己甲素对顺铂的增敏性。结果：（1）汉防己甲素的HPLC含量测定方法精密可靠，能够满足含量测定的要求；干粉剂的体外评价方法准确可信，能综合反映其性能，为制剂的评价提供合理的依据。（2）以喷雾干燥法制备药物微粉，通过调节和控制一系列的可变参数，使制备的药物微粉粒径均一，符合肺部给药1-5μm的要求。其工艺为：乙醇浓度30%，物料浓度0.7%（W/V），进口温度130℃，抽气机功率100%，恒流泵泵速4.0mL·min-1。所制备的药物微粉体积平均粒径为2.8±0.3μm，体外沉积率为59.4±2.9%，排空率为95.7±0.2%。经单因素考察后，选择的载体为乳糖，与药物微粉均匀混合后得干粉剂，体外沉积率达78.9±0.8%，排空率为98.1±0.1%，显著改善了药物微粉的雾化性能。（3）汉防己甲素微粉联合顺铂对A549细胞株进行增敏机制的研究，其中汉防己甲素的加入可以将顺铂的IC50值由11.3±0.1μmol·L-1降低为6.0±0.1μmol·L-1对细胞的凋亡率由23.8±5.6%提高到42.4±0.8%，而细胞周期实验中，与单独使用顺铂相比，可将细胞周期中S期的比例由16.4±0.7%提高到46.4±3.1%，由此可见，这可能与汉防己甲素对顺铂的增敏作用有关；在耐药细胞株A549/DDP的研究中，汉防己甲素的加入将顺铂的IC50值由52.3±1.2μmol·L-1降低为9.0±0.3μmol·L-1，而细胞周期中S期的比例由29.4±3.5%提高为50.4±2.0%，由此推测在耐药细胞株中，汉防己甲素依然可以增加顺铂对细胞的敏感性。结论：本文制备了汉防己甲素干粉吸入剂，并建立体外评价方法，测得其雾化性能良好；同时证明，无论是作用于耐药细胞株还是非耐药细胞株，汉防己甲素对顺铂均有增敏的效果。机制可能与汉防己甲素对细胞周期的调控有关。此研究为汉防己甲素肺部给药系统的开发和应用奠定了理论基础。