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环境内分泌干扰物(Endocrine Disrupting Chemicals,EDCs)被定义为对维持自身平衡、生殖、发育和行为的体内激素的合成、传输、键合、作用或清除有干扰作用的外源性物质,这些物质能够模拟、强化或抑制激素合成的作用,在某些情况下,可能引发组织或器官功能异常和肿瘤发生。由于职业和环境因素使人类越来越多地暴露于这类干扰物中,严重影响人类的生殖功能和身体健康。作为环境内分泌干扰物之一的甲氧滴滴涕(methoxychlor, MXC),是近年来被广泛应用的、代替滴滴涕的有机氯杀虫剂,与滴滴涕相比具有在哺乳动物体内代谢快,易排泄、毒性低等特点。MXC及其代谢产物已经证实可引起雌性大鼠下丘脑-垂体-卵巢性腺轴紊乱,合成、分泌甾体激素减少,可以使子宫内膜增厚,质量增加,可能影响卵泡的周期性变化。而目前有关MXC对子宫内膜血管生成的影响报道较少。因此研究甲氧滴滴涕对子宫组织,特别是对内膜血管生成的毒性作用具有重要意义。本研究通过构建雌性小鼠甲氧滴滴涕染毒模型,观察其对雌鼠子宫内膜血管生成素-1表达的影响,进一步探讨MXC在子宫内膜疾病发生发展中的作用,试图为临床诊断及治疗提供新的理论依据。本实验分三部分:第一部分:甲氧滴滴涕染毒雌性小鼠模型的构建及其对子宫的毒性作用将40只成年雌性昆明小鼠适应性饲养7日后,随机分为溶剂芝麻油组(对照组)及MXC 50,100,200mg/(kg·d)组,连续21d天经腹腔注射MXC染毒,染毒结束后立即处死小鼠,观察指标有:体重、子宫增殖指数;苏木素-伊红染色(Hematoxylin-Eosin Stain,HE)光镜下测量子宫内膜上皮细胞层增生高度和基质细胞层厚度;放射免疫法测定血清中E2和P的水平。结果:①各剂量组小鼠体重成增长趋势,但无显著性差异,中高剂量组子宫内膜上皮细胞增生高度和基质细胞层厚度与对照组相比有显著性差异。②中高剂量组子宫增殖指数随剂量增加而升高;③中、高剂量组血清E2水平显著降低,P与对照组比较无显著性差异。结论:①MXC可以增加子宫重量,增加子宫内膜上皮细胞增生高度及基质细胞层厚度;②中高剂量的MXC可能通过影响下丘脑-垂体-卵巢轴从而使E2水平降低;③低剂量组对子宫组织未产生明显的影响。第二部分:甲氧滴滴涕染毒对小鼠子宫内膜血管生成素-1蛋白表达水平的影响以实验一中石蜡包埋子宫组织为标本,观察指标有:免疫组化SP法和免疫荧光,显微镜下观察,计算各剂量组平均光密度;免疫组化SP法观察各剂量组子宫内膜组织ANGPT-1蛋白表达水平。结果:①SP法显示随染毒剂量增加,中高剂量组ANGPT-1蛋白在子宫内膜中的表达明显高于对照组,平均光密度较低剂量组及对照组增加,低剂量组与对照组无显著性差异;②与分泌期相比,中高剂量组子宫内膜ANGPT-1在增殖期的表达增加更明显。结论:①中高剂量MXC可提高小鼠子宫内膜组织血管生成素ANGPT-1蛋白的表达;②中高剂量组子宫内膜ANGPT-1在增殖期的增加可能是呈雌激素依赖性,可能促进子宫内膜修复,也可能促进异常子宫内膜血管生成,如子宫内膜增生过长及子宫内膜癌等;在分泌期的增加可能是通过使VSMC增殖而促进螺旋动脉成熟和稳定。第三部分:甲氧滴滴涕染毒对小鼠子宫内膜血管生成素-1mRNA表达水平的影响动物染毒途径及方法同实验一,处死各组小鼠后迅速取出子宫内膜组织,提取RNA。采用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法检测ANGPT-1 mRNA的表达水平,计算ANGPT-1mRNA相对含量。结果:MXC中高剂量组ANGPT-1mRNA相对含量明显高于对照组,低剂量组与对照组表达无差异性。结论:中高剂量的MXC可以提高小鼠子宫内膜ANGPT-1基因的转录水平,进而影响子宫内膜的生理病理过程。