论文部分内容阅读
目的:用恐伤肾联合力竭游泳法建造肾精亏虚证动物模型,研究肾精亏虚证小鼠生长发育状况,以及脑组织抗氧化能力等,探讨滋补肾精方对肾精不足证小鼠生长发育的影响及其治疗作用。方法:1.将50只小鼠常规饲养三天后随机分为正常组(normal group,NG)、模型组(model group,MG)、金匮肾气丸组(Jinkui Shenqi Wan group,JKG)以及滋补肾精方高剂量组(high-dose Modified Zibu Shenjing Fang group,HDG)、滋补肾精方低剂量组(lower-dose Modified Zibu Shenjing Fang group,LDG),共5组,每组10只。除正常组外,其它各组均置于猫笼之下,与猫仅一网之隔,鼠与猫24h共处进行恐吓。此外,每天早晚各用一只活鼠喂猫示众,连续恐吓21d。并于每日下午2点在水深30cm(25℃)、容积10000ml的塑料缸内强迫小鼠游泳,至无力下沉时捞出,以被动诱导劳倦过度。造模同时,模型组每天灌胃生理盐水(0.2ml·kg-1·d-1),金匮肾气丸组每天灌胃金匮肾气丸混悬液(2.7g·kg-1·d-1),滋补肾精方高剂量组与低剂量组每天灌胃滋补肾精方(20g·kg-1·d-1、10g·kg-1·d-1),正常组不做任何处理,自由摄食饮水,连续21d。观察小鼠皮毛、神态、活动度及灌胃配合状况,并每天记录摄食量、饮水量、游泳时间、称量小鼠体质量,处死后测量股骨长度并称量股骨加股四头肌重量。用考马斯法测定蛋白浓度,使用酶联免疫吸附法(ELISA)测量血清瘦素(Leptin)、脑组织瘦素受体(Leptin receptor,Ob-R)、神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)含量。2.实验动物分组、造模及给药与1相同。用考马斯法测定蛋白浓度,用硫代巴比妥法测量脑组织中丙二醛(MDA),用黄嘌呤氧化酶法检测脑组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、用分光光度法测脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性。结果:模型组小鼠活动减少,行动迟缓,易受惊吓,反应迟钝,腰背蜷缩,拥挤扎堆,体毛枯疏、晦暗或发黄无光泽,采食量及饮水量明显减少;经测量模型组体重减轻、游泳耐力时间下降,股骨长度及股骨加股四头肌重量降低。血清Leptin含量升高;脑组织Ob-R活性升高,NPY活性降低,T-SOD、GSH-PX活性减弱,MDA活性升高。使用金匮肾气丸和滋补肾精方治疗后,可明显改善小鼠肾精不足证的证候表现,提高小鼠摄食量、饮水量和体质量,增强游泳耐力,增加股骨长度及股骨加股四头肌重量,降低血清Leptin和脑组织Ob-R浓度、升高NPY活性;升高脑组织SOD和GSH-Px含量、降低MDA活性。结论:肾精亏虚证时机体的生长发育迟缓,脑组织抗氧化功能减退,Leptin—Ob-R—NPY轴调节功能减弱;补肾可调节机体的生长发育和改善脑组织抗氧化功能,改善Leptin—Ob-R—NPY轴的调节功能。