论文部分内容阅读
目的:了解大鼠肝切除术后肝淤血对早期肝功能、肝再生的影响并探讨其机制。方法:第一部分:60只SD大鼠随机平均分为2组;非淤血组:70%肝脏切除(中叶+左叶);淤血组:70%肝脏切除(中叶+左叶)合并全尾状叶淤血(淤血体积占剩余肝脏体积约1/3)。每组30只,20只用于术后生存分析,10只用于相关实验。全自动生化分析仪检测肝功能指示。肝脏组织切片H&E染色,观察病理变化。Western Blot检测cleaved casepase-3及PCNA蛋白表达。第二部分:90只SD大鼠随机平均分为3组:非淤血组:70%肝脏切除(中叶+左叶);淤血组:70%肝脏切除(中叶+左叶)合并全尾状叶淤血(淤血体积占剩余肝脏体积约1/3);淤血+脾切除组:70%肝脏切除组(中叶+左叶)合并全尾状叶淤血+脾切除。每组30只,20只用于术后生存观察,10只用于相关实验。术后12h、24h每个时间点各取5只大鼠用静脉测压尺测定门静脉压力,压力测定完之后,抽取血液,采集肝脏标本。肝功能用全自动生化分析仪检测,肝脏组织切片H&E染色,免疫组织化学检测表达CD68巨噬细胞,ELISA检测透明质酸(HA)反应肝窦内皮细胞损伤。RT-PCR检测血管调节相关基因(ET-1、eNOS)、炎症因子(TNF-α、IL-6)的表达。Western Blot检测cleaved casepase-3、Hif-1α蛋白表达。结果:第一部分:两组大鼠5d生存率:非淤血组75%、淤血组20%。术后12、24h,淤血组大鼠血氨浓度、总胆红素水平明显高于非淤血组(p<0.05)。通过westernblotting检测发现淤血组pcna表达在术后24h明显低于非淤血组。术后24h,淤血组alt、ast显著高于非淤血组(p<0.05),同时淤血组未淤血肝脏组织肝细胞出现大量空泡样变性,通过westernblotting检测发现在该时间点非淤血组肝脏组织cleavedcasepase-3表达明显低于淤血组的未淤血肝脏组织。第二部分:三组大鼠5d生存率:非淤血组75%、淤血组20%、淤血+脾切除组55%,术后12、24h淤血组总胆红素水平、门静脉压力(pvp)、透明质酸(ha)、tnf-a、il-6、et-1、enosmrna相对表达量高于非淤血组;同时与非淤血组相比,淤血组的未淤血肝脏cd68阳性标记细胞、空泡样变性细胞增多、cleavedcasepase-3、hif-1α蛋白表达增强。当大鼠在肝淤血基础上切除脾脏之后总胆红素水平、pvp、ha、(tnf-α、il-6、et-1、enos)mrna相对表达量、cleavedcasepase-3、hif-1α表达量、cd68阳性标记细胞数、空泡样变性细胞数降低。结论:第一部分:在大鼠70%肝脏切除加全尾状叶淤血的模型中,肝淤血使未淤血肝脏组织出现肝细胞空泡样变性和细胞凋亡增加导致残肝功能受损加重、大鼠死亡率增加,同时肝再生减弱。第二部分:在大范围肝切除的基础上,较大范围的肝淤血通过升高门静脉压力引起肝脏微循环破换、组织缺氧、炎症,从而导致残肝未淤血肝脏细胞空泡样变性、细胞凋亡增加、肝功能受损加重、大鼠死亡率增加。