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Tal是高活性的免疫调节剂,由28个氨基酸构成,N末端乙酰化,属于酸性较强的肽,分子中有一个α-螺旋和一个p-转角的的二级结构,这些性质决定制备高纯度高质量的Tal的难度。本文由两方面入手,合成方面以降低消旋肽杂质和缺失肽杂质产生为主要目的,筛选最佳合成条件；纯化方面以困难杂质为主要对象,优化纯化方法,最终制备出高纯Tal。以固相王树脂为载体,采用固相法合成Tal,针对合成过程中可能产生的消旋肽杂质和缺失肽杂质,采取相应的措施避免或者减少这些杂质的产生,以高效副反应小的试剂为缩合试剂,在形成a螺旋和p转角的氨基酸位点进行复投反应以促进偶联完全。实验过程中对缩合体系、氨基酸投料比、缩合反应时间以及反应温度等进行考察,以高效缩合、副反应小的TBTU/HOBt/DIEA体系作为主反应的偶联体系,以降低消旋杂质的产生,缩短合成周期,在5-8位、17～24位氨基酸位点以HOBt/DIC体系为复投反应缩合体系,以降低缺失肽杂质的生成,在对投料比的研究中,选择投料摩尔比为5：1,主反应时间为80～100min,反应温度为30+2℃,复投反应时间为2～3h,反应温度为30～35℃,并且选择合适的氨基酸-王树脂的替代度范围(0.25～0.35mmol·g-1),以降低位阻效应带来的偶联难度,促进氨基酸偶联的完全反应,对比对照组实验,工艺收率提高28.6%。粗肽采用反相离子对液相色谱法分离纯化,以反相C18填料为固定相,一定浓度的离子对试剂水溶液为洗脱A相,乙腈为洗脱B相,多步纯化得到高纯Tα1。文中采用三氟乙酸乙腈体系和四甲基氢氧化铵乙腈体系相结合,选择不同浓度、不同pH的四甲基氢氧化铵水溶液作为二步纯化的洗脱A相,两步纯化后得到高纯度Tal。再以一定浓度的甲醇水作为洗脱液反相脱除大部分盐离子,进一步提高了产品纯度。反相离子对液相色谱的运用,解决了长肽难以制备出高纯产品的问题。采用离子交换-反相色谱法脱除Tα1精制液中的有机盐,以离子交换树脂为固定相,改变Tα1的带电状态,与离子对试剂四甲基氢氧化铵形成离子排斥,以一定浓度的乙醇氨水溶液为洗脱液,将Tal与离子对试剂四甲基氢氧化铵分开,达到脱除有机盐的目的,再以反相色谱法将引入的无机盐脱除,经冷冻干燥得到高纯Tal冻干粉。本文建立了完整的Tal制备工艺,为其它长链多肽的的制备提供参考。