口蹄疫（foot-and-mouth disease, FMD）是威胁畜牧业稳定、健康发展的重要传染病之一，主要感染偶蹄动物，如猪、牛、羊、骆驼、羚羊、鹿等。FMD传播速度快，在短时间内形成大范围的流行，给相关国家（地区）带来巨大的经济损失，严重制约着畜牧业的发展。目前我国对口蹄疫的防控策略以免疫预防为主，但是由于普遍采用的全病毒灭活疫苗有各种不足，以基因工程技术为基础研发的疫苗具有潜在的应用价值。本实验利用猪圆环病毒2型衣壳蛋白形成的病毒样颗粒展示O型口蹄疫病毒的一个中和表位，主要目的是研制基于表位的口蹄疫疫苗。口蹄疫病毒的衣壳是二十面体，由VP1、VP2、VP3、VP4四种结构蛋白组成的60个不对称原粒构成，FMDV粒子表面明显的特征是VP1的一个环（G-H loop）突出于表面，表现为物理上的可动性和生化上的多功能性，G-H环含有高度保守的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg-Gly-Asp）(RGD)基序，这一基序既是细胞吸附位点的主成分，又是重要的中和位点，G-H环的跨度是VP1的第140-160位的20个氨基酸残基。为了将口蹄疫病毒（Foot-and-mouth disease virus, FMDV）中和表位展示在病毒样颗粒（Virus-like particle, VLP）表面，以猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type2,PCV2）衣壳蛋白为骨架，用FMDV O/Mya-98/2010毒株G-H环替换PCV2自身中和表位，构建嵌合衣壳蛋白Cao。为分泌表达Cao蛋白，在芽胞杆菌穿梭质粒pHCMC05的多克隆位点（multiple cloning site, MCS）中顺次插入枯草芽孢杆菌P43启动子和中性蛋白酶B分泌信号肽（neutral protease B signal peptide, nprBsp），构建分泌型大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体p7257-P43。然后将Cao基因插入p7257-P43载体nprBsp下游，构建分泌表达质粒p7257-P43-Cao。将该质粒转化枯草芽孢杆菌WB800，氯霉素诱导表达。上清经SDS-PAGE检测，嵌合蛋白Cao在枯草芽孢杆菌中得到表达；Western-blot证实该蛋白具有免疫反应性；透射电镜可观察到直径约15nm±2nm的VLP，表明嵌合蛋白在体外能有效组装。