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目的本实验运用联合顺次法(关节冲洗,透明质酸注射,中药离子导入)治疗实验兔膝骨性关节炎,通过检测实验兔胫骨上端骨内压和膝关节液一氧化氮水平的变化以及对膝关节软骨的病理形态学观察,初步阐明联合顺次法对膝关节炎的作用机理,为临床上膝关节冲洗,关节腔内透明质酸注射,中药离子导入顺次治疗膝骨性关节炎提供理论及实验依据。方法本实验将70只体重为2.5kg(±100g)健康成年性大耳兔雌雄随机分成7组分为正常组(Ⅰ)、模型组(Ⅱ)、关节冲洗组(Ⅲ)、透明质酸注射组(Ⅳ)、中药离子导入组(Ⅴ)、骨友灵擦剂组(Ⅵ))、联合顺次组(Ⅶ),每组10只。采用结扎一侧股静脉致骨内高压的方式造模,造模8周后采用各组对应的方法处理或治疗,正常组和模型组造模后不做任何特殊处理。将骨髓活检穿刺针穿刺达兔胫骨上端髓腔内,以三通管与传感器相连检测骨内压,后将动物处死,迅速抽取膝关节液,检测一氧化氮含量。然后解剖膝关节,肉眼观察兔关节软骨表面情况后,切取的部分股骨软骨按照标本制备方法制定后,进行光镜观察并摄像。结果1.骨内压水平:模型组骨内压水平明显高于正常组;与关节冲洗组、透明质酸注射组、中药离子导入组、骨友灵擦剂组、联合顺次组相比,有显著性差异(P＜0.01),其中以联合顺次组降低更明显。联合顺次组与其他治疗组相比有差异(p＜0.05)。关节冲洗组、透明质酸注射组、中药离子导入组,骨友灵擦剂组之间骨内压水平无明显性差异(p＞0.05)。2.关节液中NO含量水平:模型组兔关节液中NO明显高于正常组,与各治疗组相比,有显著性差异(P＜0.01),关节冲洗组、透明质酸注射组、中药离子导入组、骨友灵擦剂组之间无明显差异(P＞0.05),联合顺次组与其他治疗组相比有差异(p＜0.05)。治疗组中联合顺次组NO含量水平降低更明显。3.肉眼及光镜下观察:肉眼下正常组膝关节软骨无异常变化,模型组中关节软骨改变最明显,其关节软骨变黄、变软,表层软骨可见不规则的裂隙,甚至有缺损及新赘生物;关节滑膜充血,周围组织部分粘连。联合顺次组表层软骨破坏比模型组明显减轻。光镜下模型组软骨表层细胞明显减少,整个软骨细胞排列紊乱。联合顺次组软骨细胞未见明显减少,表层软骨细胞轻度紊乱。其他各治疗组关节软骨病变程度较模型组为轻,其中关节冲洗组、透明质酸注射组、中药离子导入组、骨友灵擦剂组之间无明显区别。通过肉眼及光镜下观察联合顺次组与其他治疗组相比能较好改善兔膝关节软骨的破坏,从而起到延缓关节软骨的退变。结论联合顺次疗法对治疗膝骨关节炎有很好的治疗效果,且联合顺次疗法的作用优于每一种治疗方法单用。实验结果表明联合顺次疗法可通过降低兔胫骨上端骨内高压,膝关节液一氧化氮水平来减轻关节软骨破坏,而达到延缓关节软骨退变的作用。为临床膝关节冲洗、关节腔内透明质酸注射、中药离子导入顺次治疗膝骨性关节炎提供理论和实验依据。