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目的建立测定维酶素薄膜衣片中维生素B2含量的高效液相色谱法。方法采用SunFireTM C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以0.02 mol/L醋酸钠-甲醇(70∶30)为流动相,检测波长为267 nm,进样量20μL。结果维生素B2质量浓度在7.68～46.12μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 9(n=7);平均回收率为99.43%,RSD为0.74%(n=9)。结论该方法简便、快速、准确、重现性和稳定性好,可作为维酶素薄膜衣片的维生素B2含量测定方法。