【摘 要】
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目的:研究血小板源性生长因子(PDGF-BB)对血管平滑肌细胞(VSMC)G0S2基因mRNA表达的调控,并初步探讨其机制。方法:体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,逆转录实时定量聚合酶联反应(RT-QPCR)法测定PDGF-BBJVSMC中G0S2 mRNA表达影响的时效关系和量效关系;运用不同细胞信号通路阻断剂处理,研究PDGF-BB影响G0S2 mRNA表达的信号途径;转染含有G0S2基因启动子的荧光素酶报告基因质粒pGL3-G0S2-Promotor,检测PDGF-BB对G0S2基因启动子活性的影响。
【机 构】
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武汉大学人民医院心血管内科;湖北医药学院心脏病研究中心;
【基金项目】
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湖北省教育厅科研项目(编号:T201212;Q20122401)
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目的:研究血小板源性生长因子(PDGF-BB)对血管平滑肌细胞(VSMC)G0S2基因mRNA表达的调控,并初步探讨其机制。方法:体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,逆转录实时定量聚合酶联反应(RT-QPCR)法测定PDGF-BBJVSMC中G0S2 mRNA表达影响的时效关系和量效关系;运用不同细胞信号通路阻断剂处理,研究PDGF-BB影响G0S2 mRNA表达的信号途径;转染含有G0S2基因启动子的荧光素酶报告基因质粒pGL3-G0S2-Promotor,检测PDGF-BB对G0S2基因启动子活性的影响。结果:PDGF-BB能够增加平滑肌细胞G0S2 mRNA表达,PDGF-BB诱导VSMC表达G0S2mRNA在12h后达峰值[20ng/ml增加(2.83±0.81)倍;10ng/ml增加(2.99±0.12)倍,P<0.05],随后降低。p38MAPK和PI3K/AKT信号通路阻断剂可显著抑制PDGF-BB诱导的G0S2mRNA表达(P<0.05),并且PI3K/AKT信号通路阻断剂可以明显降低G0S2 mRNA的基础表达水平。荧光素酶活性分析显示,PDGF-BB可增强G0S2基因启动子活性(P<0.05)。结论:PDGF-BB上调VSMC中G0S2基因mRNA的表达,并且可以增强G0S2基因启动子活性,p38MAPK和PI3K/AKT通路可能介导了这种作用。
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