【摘 要】
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利用脂质体转染法获得转Toll样受体4（Toll-like receptors 4,TLR4）基因的成纤维细胞,将其作为供体细胞,再通过体细胞核移植技术构建重构胚,最终生产出转TLR4基因且性别可控的大
【机 构】
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北京农学院动物科学技术学院兽医学（中医药）北京市重点实验室
【基金项目】
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2013年度北京市教委北京市属高等学校创新团队建设与教师职业发展计划项目“体细胞转基因克隆肉牛新品系培育与利用”（PXM2013_014207_000067）,2014年度国家科技重大专项“转基因生物新品种培育”一级子课题“抗病转基因羊扩繁体系初步建立”研究（2014ZX08008005-003）,2013年度国家自然基金面上项目“牛体内外植入前胚胎IFNτ的差异表达及对子宫上皮细胞ISG15和W
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利用脂质体转染法获得转Toll样受体4（Toll-like receptors 4,TLR4）基因的成纤维细胞,将其作为供体细胞,再通过体细胞核移植技术构建重构胚,最终生产出转TLR4基因且性别可控的大尾寒羊.本研究通过原代培养大尾寒羊胎儿皮肤成纤维细胞,并进行SRY基因性别鉴定,利用脂质体转染法转入TLR4基因,然后分别从形态学与分子水平检测TLR4基因的表达,将稳定表达转TLR4的成纤维细胞核移植入绵羊去核卵母细胞中构建重构胚.最终获得5个稳定表达TLR4的阳性细胞克隆,经SRY基因性别鉴定为雌性细胞
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