膈下逐瘀汤对EMT气滞血瘀型大鼠NF-κB信号通路及其下游因子的影响

来源 :中国实验方剂学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:youyou061017
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目的:探讨膈下逐瘀汤对子宫内膜异位症(EMT)气滞血瘀型大鼠的治疗作用及其机制研究。方法:从60只SPF级雌性未孕健康SD大鼠中随机抽取6只作为空白组,其余采用复合因素法构建气滞血瘀型EMT大鼠模型。从造模成功的36只大鼠中随机抽取30只分为模型组、甲羟孕酮组(0.416 mg·kg-1)及膈下逐瘀汤低、中、高剂量组(4.063、8.125、16.25 g·kg-1),每组6只,每天灌胃1次,连续4周。通过大鼠病理学变化、异位灶体积反映大鼠造模情况及膈下逐瘀汤对EMT大鼠的影响;取各组内膜组织进行苏木素-伊红(HE)染色,观察组织病理变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组血清上清液中白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-6(IL-6)含量;免疫组化(IHC)检测各组大鼠组织中核转录因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)蛋白表达情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测NF-κB、MMP-9、VEGF、Bax mRNA表达。结果:治疗后,膈下逐瘀汤低、中、高剂量组和甲羟孕酮组异位灶体积明显缩小;镜下病理观察可见假手术组与空白组大鼠子宫内膜结构完整,腺体及间质细胞生长良好,腺上皮细胞排列紧密整齐,胞浆丰富呈高柱状;间质细胞分布均匀,血管丰富,呈梭形。与空白组、假手术组比较,模型组以柱状上皮和立方上皮为主,异位内膜上皮细胞呈短柱状,部分为假层状,细胞形态不完整,间质细胞和腺体的数量减少,部分腺体呈圆形,蜕膜发育不良。与空白组比较,模型组血清中IL-10含量明显降低(P<0.05),IL-6含量明显升高(P<0.05),模型组在位、异位内膜组织中NF-κB、VEGF、MMP-9蛋白表达明显升高(P<0.05),Bax蛋白表达明显降低;与模型组比较,膈下逐瘀汤中、高剂量组血清中IL-10含量明显升高(P<0.05),IL-6含量明显降低(P<0.05),膈下逐瘀汤各剂量组大鼠在位、异位内膜组织NF-κB、VEGF、MMP-9蛋白表达明显降低(P<0.05),Bax蛋白表达明显升高(P<0.05)。与模型组异位内膜比较,膈下逐瘀汤中、高剂量组异位内膜中NF-κB、MMP-9、VEGF mRNA表达明显降低(P<0.05),Bax mRNA表达明显升高(P<0.05)。结论:膈下逐瘀汤具有抑制气滞血瘀型EMT大鼠异位内膜组织扩大及侵袭,其机制可能与干预NF-κB信号通路过度激活所介导的免疫抑制、改善炎症反应、阻断微血管新生功能有关。
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