【摘 要】
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目的观察不同条件下人肺微血管内皮细胞(HPMEC)中核因子红细胞系2相关因子2(Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达变化，探讨Nrf2抑制铁死亡在减轻高氧肺损伤(HLI)过程中的作用。方法采用HPMEC建立高氧暴露模型。将HPMEC按照简单随机分组分为4组：对照组、高氧组(氧体积分数950mL/L)、铁死亡抑制剂组(氧体积分数950mL/L，10μmol/LFerrostatin)及Nrf2抑制剂组(氧体积分数950mL/L，10μmol/LML385)，分别在24h、48h使用细胞活性检测
【机 构】
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上海交通大学医学院附属儿童医院，上海市儿童医院新生儿科，上海 200062上海交通大学医学院附属儿童医院，上海市儿童医院新生儿科，上海 200062上海交通大学医学院附属儿童医院，上海市儿童医院新生儿
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目的观察不同条件下人肺微血管内皮细胞(HPMEC)中核因子红细胞系2相关因子2(Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达变化，探讨Nrf2抑制铁死亡在减轻高氧肺损伤(HLI)过程中的作用。
方法采用HPMEC建立高氧暴露模型。将HPMEC按照简单随机分组分为4组：对照组、高氧组(氧体积分数950 mL/L)、铁死亡抑制剂组(氧体积分数950 mL/L，10 μmol/L Ferrostatin)及Nrf2抑制剂组(氧体积分数950 mL/L，10 μmol/L ML385)，分别在24 h、48 h使用细胞活性检测试剂盒测定细胞活性，荧光活性氧(ROS)试剂盒检测各组细胞内ROS水平，应用实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测Nrf2、GPX4的mRNA及其蛋白表达水平。2组间比较采用两样本t检验；多组间比较采用单因素方差分析。
结果1.与对照组相比，高氧组HPMEC细胞活性降低，细胞内ROS含量增加，24 h及48 h GPX4 mRNA(24 h：0.750±0.010比1.010±0.160，48 h：0.690±0.050比1.000±0.070)和蛋白表达(24 h：0.160±0.010比0.290±0.010，48 h：0.190±0.010比0.250±0.010)均下降，Nrf2 mRNA(24 h：1.740±0.050比1.000±0.050，48 h：2.130±0.020比1.000±0.030)和蛋白表达(24 h：0.840±0.010比0.480±0.010，48 h：0.840±0.010比0.550±0.030)均增加，差异均有统计学意义(均P
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