【摘 要】
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目的研究七叶皂苷钠对人甲状腺未分化癌HTh74细胞株增殖的潜在抑制作用及其分子机制。方法以不同浓度的七叶皂苷钠(0，20，40，60，80 μmol/L)处理HTh74细胞48 h后，观察细胞形态变化；以不同浓度的七叶皂苷钠(0，20，40，60，80 μmol/L)处理HTh74细胞24 h、48 h和72 h后，噻唑蓝比色(MTT)法检测七叶皂苷钠对HTh74细胞株增殖的抑制效应并计算细胞增殖
【机 构】
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210028 南京中医药大学附属中西医结合医院，江苏省中医药研究院，国家中医药管理局瘿病证治重点研究室,210028 南京中医药大学附属中西医结合医院，江苏省中医药研究院，国家中医药管理局瘿病证治重点
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目的研究七叶皂苷钠对人甲状腺未分化癌HTh74细胞株增殖的潜在抑制作用及其分子机制。
方法以不同浓度的七叶皂苷钠(0，20，40，60，80 μmol/L)处理HTh74细胞48 h后，观察细胞形态变化；以不同浓度的七叶皂苷钠(0，20，40，60，80 μmol/L)处理HTh74细胞24 h、48 h和72 h后，噻唑蓝比色(MTT)法检测七叶皂苷钠对HTh74细胞株增殖的抑制效应并计算细胞增殖率及半数抑制率(IC50)；以不同浓度的七叶皂苷钠(0，5，10，15，20，25 μmol/L)处理HTh74细胞48 h后，Western印迹检测七叶皂苷钠引起的蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)以及细胞周期相关蛋白的表达。
结果七叶皂苷钠作用后，细胞发生明显皱缩，且作用浓度越高细胞皱缩越明显；MTT法结果显示，七叶皂苷钠对HTh74细胞有显著的生长抑制作用，呈现典型的时间与剂量依赖性，80 μmol/L七叶皂苷钠作用24 h，对细胞的生长抑制作用有统计学意义(F＝111.4，P<0.01)，而40 μmol/L作用48 h及72 h时，细胞生长均受到抑制(F＝543.6，722.1，P<0.01)，并且48 h的IC50为69.4 μmol/L，72 h的IC50为32.5 μmol/L；七叶皂苷钠作用48 h后Akt、p-Akt和细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)2的表达显著降低，并呈现剂量依赖效应。与未经处理的细胞相比，低浓度(5 μmol/L和10 μmol/L)七叶皂苷钠处理时Akt和p-Akt的表达水平已开始降低(F＝613.9，P<0.05)，而从15 μmol/L开始，CDK2表达的降低有统计学意义(F＝208.9，208.3，P<0.05)。CDK1、CDK6、细胞周期蛋白D以及细胞周期蛋白E的表达在各处理组间差异无统计学意义(P均>0.05)。
结论七叶皂苷钠可抑制人甲状腺未分化癌HTh74细胞的增殖，可能是通过调节Akt、p-Akt以及CDK2等蛋白的表达实现的。
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