长栲利素A通过PI3K/AKT通路抑制脑胶质瘤细胞增殖

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目的

探讨长栲利素A对脑胶质瘤细胞增殖的影响及其作用机制。

方法

复苏冻存的人脑胶质瘤细胞株U87、SNB19并予以体外传代培养,应用CCK-8实验检测0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0、6.0、8.0 μmol/L长栲利素A干预24 h、48 h后细胞活性的变化,应用Edu增殖实验检测0、1、2、3 μmol/L长栲利素A干预后Edu阳性细胞数量的变化,应用细胞克隆形成实验检测0、0.1、0.2、0.3 μmol/L长栲利素A干预后细胞集落形成数的变化,应用流式细胞术检测0、1、2、3 μmol/L长栲利素A干预后细胞周期占比的变化,应用Western blotting检测0、1、2、3 μmol/L长栲利素A干预后细胞增殖相关蛋白Ki-67、c-Myc及细胞周期相关蛋白细胞周期素B1(Cyclin B1)、细胞周期素D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶-1(CDK1)以及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路相关蛋白的表达变化。

结果

与0 μmol/L相比,0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0、6.0、8.0 μmol/L长栲利素A干预24 h、48 h后U87、SNB19细胞活性均逐渐降低,且呈剂量依赖性。与0 μmol/L长栲利素A组相比,2、3 μmol/L长栲利素A组U87、SNB19细胞中Edu阳性细胞数量明显降低,0.1、0.2、0.3 μmol/L长栲利素A组U87、SNB19细胞集落形成数明显降低,2、3 μmol/L长栲利素A组U87、SNB19细胞中G2/M期细胞占比明显升高,2、3 μmol/L长栲利素A组U87、SNB19细胞中Ki-67、c-Myc、Cyclin B1、CDK1、磷酸化PI3K及磷酸化AKT表达明显降低,Cyclin D1表达明显升高,差异均有统计学意义(P

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