【摘 要】
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目的探讨从骨肉瘤细胞培养上清提取exosomes及鉴定其表面标志。方法采用超滤离心联合蔗糖密度梯度超速离心的方法从骨肉瘤细胞培养上清液中分离exosomes,用透射电子显微镜观
【机 构】
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遵义医学院第三附属医院骨科,遵义医学院附属医院输血科,遵义医学院附属医院检验科
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目的探讨从骨肉瘤细胞培养上清提取exosomes及鉴定其表面标志。方法采用超滤离心联合蔗糖密度梯度超速离心的方法从骨肉瘤细胞培养上清液中分离exosomes,用透射电子显微镜观察exosomes的形态,Western印迹鉴定其表面CD81及组织相溶性复合体(MHC)-I类分子的表达。结果透射电镜下见骨肉瘤细胞分泌的exosomes为圆形或类圆形小体,直径约60~100 nm,聚集成团或散在分布;Exosomes表达CD81及MHC-Ⅰ类分子,exosomes CD81及MHC-I类分子的表达水平较骨肉瘤细胞高。结论从骨肉瘤细胞培养上清液中成功分离出exosomes,其表达抗原提呈相关的免疫分子。
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