【摘 要】
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目的构建SarA的原核表达载体,对SarA蛋白免疫原性进行初步研究.方法首先应用生物信息学方法对SarA基因进行分析;以金黄色葡萄球菌基因组为模板,通过PCR扩增、酶切、连接等一
【机 构】
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北华大学基础医学院,北华大学基础医学院感染与免疫研究中心
【基金项目】
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吉林省科技发展计划项目(20180101142JC),北华大学大学生创新创业训练项目(201811923138),北华大学研究生创新项目(2018002).
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目的构建SarA的原核表达载体,对SarA蛋白免疫原性进行初步研究.方法首先应用生物信息学方法对SarA基因进行分析;以金黄色葡萄球菌基因组为模板,通过PCR扩增、酶切、连接等一系列反应进行原核重组质粒的构建;IPTG诱导原核重组质粒表达,对SarA蛋白进行纯化、浓缩,将浓缩后的蛋白与佐剂混合免疫家兔,收集血清,通过间接ELISA法检测血清抗体效价,并通过Western blot鉴定抗体特异性.结果成功构建重组表达质粒SarA-pET32a(+),通过IPTG诱导表达,获得以可溶形式高效表达的SarA蛋白
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