【摘 要】
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目的 探究芍药苷对大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)发生过程中体内Th17/Treg平衡和核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路的影响.方法 将24只7～8周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为4组:正常组、模型组、芍药苷低剂量组和高剂量组,每组6只大鼠.模型组、低剂量组和高剂量组大鼠推注5％TNBS进行UC大鼠造模,然后低剂量组和高剂量组大鼠灌胃相应浓度的芍药苷,连续治疗14 d.治疗结束后,对各组大鼠进行疾病活动指数(disease ac
【机 构】
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陕西省人民医院消化内一科,西安 710068
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目的 探究芍药苷对大鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)发生过程中体内Th17/Treg平衡和核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路的影响.方法 将24只7～8周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为4组:正常组、模型组、芍药苷低剂量组和高剂量组,每组6只大鼠.模型组、低剂量组和高剂量组大鼠推注5％TNBS进行UC大鼠造模,然后低剂量组和高剂量组大鼠灌胃相应浓度的芍药苷,连续治疗14 d.治疗结束后,对各组大鼠进行疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分,并通过苏木精伊红(HE)染色进行组织病理学观察.分离大鼠脾脏T淋巴细胞并通过流式细胞仪分析Th17和Treg细胞比例.通过免疫组化染色检测结肠组织中p-P65、视黄酸相关孤儿受体 γt(retinoic acid related orphan receptor-γt,ROR-γt)和叉头盒蛋白P3(forkhead box P3,FOXP3)的表达.通过qRT-PCR检测结肠组织中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-10、IL-17、FOXP3和ROR-γt的mRNA表达.通过Western blotting检测结肠组织中P65的磷酸化水平.通过免疫荧光分析结肠组织中p65的核转位.结果 与模型组相比,低剂量组和高剂量组大鼠的结肠长度显著增加[(8.20±0.47)cm vs(9.66±0.44)cm,(10.72±0.39)cm,P<0.05].与模型组相比,低剂量组和高剂量组大鼠的DAI评分显著降低(2.83±0.41 vs 2.33±0.52,1.67±0.82,P<0.05).与模型组相比,低剂量组和高剂量组大鼠的结肠形态有所改善,结构破坏明显缓解,仅出现轻微的炎症细胞浸润.与模型组相比,低剂量组和高剂量组Th17细胞占比和Th17/Treg比率显著降低,而Treg细胞占比显著升高(均P<0.05).与模型组相比,低剂量组和高剂量组IL-6、TNF-α、IL-17和ROR-γt的mRNA表达水平显著降低(P<0.05),而TGF-β1、IL-10和FOXP3的mRNA表达水平显著升高(P<0.05).与模型组相比,低剂量组和高剂量组的P65磷酸化水平均显著降低(P<0.05).与模型组相比,低剂量组和高剂量组的细胞核中P65蛋白表达水平明显降低(P<0.05).结论 芍药苷纠正了TNBS诱导的UC大鼠体内Th17/Treg平衡并抑制了NF-κB信号通路的活化,芍药苷可能通过靶向NF-κB信号通路来调控Th17/Treg平衡,从而发挥其对UC的治疗作用.
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