【摘 要】
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根据草菇(Volvariella volvacea)的锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因序列,构建重组质粒pBARGPE1/Mn-SOD,转化大肠杆菌(Escherichia coli)Stbl3菌株,采用单因素实验对诱导剂IPTG
【机 构】
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上海市农业科学院食用菌研究所,上海201403安顺学院农学院,贵州安顺561000;皇太后大学理学院,泰国清莱57100;
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根据草菇(Volvariella volvacea)的锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因序列,构建重组质粒pBARGPE1/Mn-SOD,转化大肠杆菌(Escherichia coli)Stbl3菌株,采用单因素实验对诱导剂IPTG浓度(0、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0 mmol· L-1)、诱导培养时间(0、2、4、6、8、10 h)及MnCl2浓度(0、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0 mmol· L-1)进行优化,以获得最优表达条件.在最优条件下分别进行耐热性、耐冷性及耐盐性分析,测定重组菌pBAR GPE1/Mn-SOD和对照菌pBAR GPE1的SOD酶活力及生长情况.结果 表明:最优表达条件为IPTG浓度1 mmol·L-1,诱导培养时间6h,不需要添加MnCl2;在最优条件下,与对照菌相比,发现重组菌的SOD酶活力显著提高,生长情况较好,提高了转化菌株的耐热性、耐冷性和耐盐性.
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