中介蝮蛇毒纤溶酶基因原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

来源 :中国农学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xpzcz1986
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为了从中介蝮蛇毒腺中提取总RNA,研究其具有重要药用价值的纤溶酶,从基因工程的角度进行研究开发蛇毒资源。通过RT-PCR法扩增纤溶酶基因与pMD18-T载体连接进行TA克隆,得到FLE基因,再亚克隆到pPROEXHTb原核表达载体上,构建重组表达载体;将阳性重组表达载体转化到大肠杆菌中诱导表达,采用SDS-PAGE检测该重组蛋白的分子量。结果表明:成功的构建了重组原核表达载体ppPROEXHTb-FLE,并在大肠杆菌中获得表达,重组蛋白分子量约为30KDa。说明可以采用该方法进行中介蝮蛇毒纤溶酶的原核表达
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