免疫亲和层析纯化EGF-PE40

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用PEG融合法建立了分泌抗EGF-PE40抗体的杂交瘤细胞株,并筛选了一杂交瘤细胞株D7.用此细胞株制备了高抗体含量的腹水,用辛酸-硫酸胺沉淀法纯化了抗体IgG,用ELISA法测定其与EGF-PE40的亲和常数2.24×109L/mol,并鉴定其亚类为IgG1.将纯化后的单抗IgG与CNBr活化的Sepharose 4B偶联,并用免疫亲和层析的方法纯化粗提物中的EGF-PE40,得到了大于80%的纯化率,且产物显示了良好的生物学活性,这为EGF-PE40的进一步纯化和大量生产提供了可能.
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