慢性乙型肝炎患者肝组织HBV cccDNA、总HBV DNA与血清HBV DNA的相关性及其与临床的关系

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目的探讨慢性乙型肝炎患者肝组织HBV共价闭合环状DNA(cccDNA)、肝组织总HBV DNA(HBV tDNA)与血清HBV DNA之间的相关性及其与临床的关系。方法 78例慢性乙型肝炎患者入选本研究。肝组织β- globinDNA、HBV cccDNA和HBV tDNA采用实时荧光定量PCR方法检测,平均每个肝细胞HBV cccDNA和HBV tDNA含量(拷贝/cell)=HBV cccDNA(实测值)/β-globin DNA(实测值)和HBV tDNA(实测值)/β3-globin DNA(实测值),肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA含量的计算单位定义为log10拷贝/106cell;采用实时荧光定量PCR、ELISA法检测血清HBVDNA和HBV标志物;采用免疫组织化学方法检测肝细胞中HBsAg和HBcAg的表达。统计分析采用pearson相关分析及t检验。结果 (1)肝组织HBV cccDNA与HBV tDNA定量呈正相关(r=0.696,P<0.001);肝组织HBV cccDNA与血清HBV DNA定量呈正相关(r=0.304,P<0.01);肝组织HBV tDNA与血清HBV DNA定量呈正相关(r=0.341,P<0.01);(2)肝细胞内HBcAg定性检测阳性患者的血清HBV DNA定量明显高于阴性患者,且差异有统计学意义(P<0.05);肝细胞内HBcAg定性检测阳性患者与阴性患者的肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA定量差异均无统计学意义和(P均>0.05);(3)肝细胞内HBsAg定性检测阳性患者的血清HBV DNA定量明显高于阴性患者,且差异有统计学意义(P<0.05);肝细胞内HBsAg定性检测阳性患者与阴性患者的肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA定量差异均无统计学意义(P>0.05);(4)HBeAg(+)/抗-HBe(-)患者血清HBV DNA定量明显高于HBeAg(-)/抗-HBe(+)患者,且差异有统计学意义(P<0.05);HBeAg(+)/抗-HBe(-)患者肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA定量与HBeAg(-)/抗-HBe(+)患者比较差异均无统计学意义(均P>0.05);(5)肝组织HBV cccDNA、HBV tDNA以及血清HBV DNA三者与肝脏炎症活动度及纤维化程度均无显著相关性(P>0.05)。结论 (1)血清HBV DNA定量结果并不一定能完全反映患者肝组织中HBV cccDNA和HBV tDNA含量,尤其在血清HBV DNA<500拷贝/mL时,肝组织中仍存在HBV cccDNA和HBV tDNA,且含量大小不等。(2)肝细胞内HBcAg定性检测阳性或者HBsAg定性检测阳性患者的血清HBV DNA定量均明显高于阴性患者;而两者的肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA定量均没有显著差异;(3)HBeAg(+)/抗-HBe(-)患者血清HBV DNA定量明显高于HBeAg(-)/抗-HBe(+)患者,而两者的肝组织HBV cccDNA和HBV tDNA均没有显著差异;(4)肝组织HBV cccDNA、HBV tDNA及血清HBV DNA与肝脏炎症活动度和纤维化程度均无显著相关性。
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