【摘 要】
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【目的】构建猪瘟病毒囊膜蛋白（E2 protein）基因的真核表达载体,并将其在猪脐静脉血管内皮细胞中进行表达。【方法】采用PCR技术扩增出E2蛋白全长基因（E2qc）序列和去除跨膜基因（E2
【基金项目】
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国家“863”重大项目课题“家畜重要病毒病基因工程疫苗研究与创制”（2006AA10A204）
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【目的】构建猪瘟病毒囊膜蛋白（E2 protein）基因的真核表达载体,并将其在猪脐静脉血管内皮细胞中进行表达。【方法】采用PCR技术扩增出E2蛋白全长基因（E2qc）序列和去除跨膜基因（E2sh）序列,并将其克隆入真核表达载体pSecTag2（A）中,构建pSecTag-E2qc和pSecTag-E2sh表达载体,分别进行PCR、双酶切及测序鉴定。用脂质体法将阳性克隆瞬时转染猪脐静脉血管内皮细胞,对转染细胞进行RT-PCR检测目的基因的转录情况,同时对转染细胞及细胞上清液进行SDS-PAGE和Weste
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