【摘 要】
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为探讨胡桃楸(Juglans mandshurica)茎段在离体培养过程中褐化发生的机理.在培养基中添加不同浓度和种类的抗褐化剂,对不同培养时间的胡桃楸茎段进行生化指标测定和徒手切片染色观察.在初代培养时外植体采用70％酒精30 s,0.1％ HgC12消毒10 min,灭菌效果最好.在初代培养基中添加不同浓度和种类的抗褐化剂可以有效地防止外植体培养过程中发生褐化,并筛选出同时添加硫代硫酸钠和Vc两种试剂的培养基抗褐化能力最强.通过测定不同培养阶段茎段体内酶活性,结果发现随着培养时间的延长,褐化茎段和未褐
【机 构】
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沈阳农业大学林学院,辽宁省林木遗传育种与培育重点实验室,沈阳,110866;辽宁省沙地治理和利用研究所,阜新,123000;辽宁省林业发展服务中心,沈阳,110036;吉林省林业科学研究院,长春,13
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为探讨胡桃楸(Juglans mandshurica)茎段在离体培养过程中褐化发生的机理.在培养基中添加不同浓度和种类的抗褐化剂,对不同培养时间的胡桃楸茎段进行生化指标测定和徒手切片染色观察.在初代培养时外植体采用70％酒精30 s,0.1％ HgC12消毒10 min,灭菌效果最好.在初代培养基中添加不同浓度和种类的抗褐化剂可以有效地防止外植体培养过程中发生褐化,并筛选出同时添加硫代硫酸钠和Vc两种试剂的培养基抗褐化能力最强.通过测定不同培养阶段茎段体内酶活性,结果发现随着培养时间的延长,褐化茎段和未褐化茎段体内PPO、POD、SOD、MDA活性均呈现下降趋势,且经过2周离体培养后茎段内各种酶活性开始下降,并逐渐失活而最终导致外植体褐变死亡.这一变化过程与徒手切片染色观察结果相一致.说明胡桃楸茎段培养过程中褐化的发生与多酚类物质和酶活性密切相关.本研究初步阐明了胡桃楸茎段在离体培养过程中发生褐化的原因,为进一步研究胡桃楸组织培养获得再生植株提供一定参考.
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