【摘 要】
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目的: 建立稳定表达NT3的NIH3T3细胞株,通过体外共培养实验观察其对耳蜗螺旋神经节细胞生长的影响. 方法: 以阳离子脂质体作为载体,将携带有外源性基因NT3的重组真核表达载体
【机 构】
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第四军医大学:西京医院耳鼻咽喉科,第四军医大学:基础部生物化学与分子生物学教研室
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目的: 建立稳定表达NT3的NIH3T3细胞株,通过体外共培养实验观察其对耳蜗螺旋神经节细胞生长的影响. 方法: 以阳离子脂质体作为载体,将携带有外源性基因NT3的重组真核表达载体pIRES2-EGFP-NT3转染小鼠成纤维细胞,进行RT-PCR,Western-blot分析及免疫组化鉴定,并与耳蜗螺旋神经节细胞进行共培养实验. 结果: 得到抗G-418的阳性细胞克隆;RT-PCR的产物约为744 bp;Western-blot可见一清晰的蛋白条带,与NT3的蛋白分子量相符合. NT3免疫组化染色结果显示
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