【摘 要】
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目的 观察积雪草酸对前列腺癌细胞DU145和PC-3增殖、迁移、侵袭的影响,并探讨其对上皮间质转化(EMT)的影响和潜在调控机制.方法 体外培养DU145和PC-3细胞,以不同浓度积雪草酸干预后,采用MTT法检测其对细胞活力的影响;通过克隆形成实验检测其对细胞克隆形成能力的影响;通过细胞划痕实验、Transwell迁移及侵袭实验观察低浓度积雪草酸(10、20 μmol·L-1)对转化生长因子β1 (TGF-β1,5 ng·mL-1)诱导后DU145和PC-3细胞迁移、侵袭的影响;采用Western Blo
【机 构】
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江苏卫生健康职业学院,江苏南京211800;江苏卫生健康职业学院,江苏南京211800;南京中医药大学第一附属医院,江苏南京210029
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目的 观察积雪草酸对前列腺癌细胞DU145和PC-3增殖、迁移、侵袭的影响,并探讨其对上皮间质转化(EMT)的影响和潜在调控机制.方法 体外培养DU145和PC-3细胞,以不同浓度积雪草酸干预后,采用MTT法检测其对细胞活力的影响;通过克隆形成实验检测其对细胞克隆形成能力的影响;通过细胞划痕实验、Transwell迁移及侵袭实验观察低浓度积雪草酸(10、20 μmol·L-1)对转化生长因子β1 (TGF-β1,5 ng·mL-1)诱导后DU145和PC-3细胞迁移、侵袭的影响;采用Western Blot法检测DU145细胞的血管内皮生长因子A(VEGFA)和EMT相关纤维连接蛋白(Fibronectin)、波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)、Snail及E-钙黏蛋白(E-Cadherin)的表达情况.结果 积雪草酸可浓度及时间依赖性地抑制DU145和PC-3细胞增殖,干预24、48、72 h后的IC50值分别为29.10、17.52、11.53 μmol·L-1和27.91、21.43、14.82 μmol· L-1.积雪草酸(10、20 μmol·L-1)能够明显抑制DU145及PC-3细胞克隆形成能力.与空白组比较,TGF-β1能够明显促进DU145和PC-3细胞的划痕愈合(P＜0.01),促进DU145细胞的侵袭(P＜0.05),上调DU145细胞内VEGFA蛋白和间质指标Fibronectin、Vimentin、N-Cadherin、Snail蛋白的表达(P＜ 0.05,P＜ 0.01),下调上皮指标E-Cadherin蛋白表达(P＜0.05),进而诱导细胞EMT进程.与TGF-β1组比较,10、20 μmol·L一浓度的积雪草酸能明显抑制TGF-β1诱导后的DU145、PC-3细胞划痕愈合及Transwell细胞迁移、侵袭(P＜ 0.05,P＜0.01),且呈现浓度依赖性;10 μmol· L-1浓度的积雪草酸能明显下调TGF-β1诱导的DU145细胞内的VEGFA、Fibronectin、Vimentin、N-Cadherin、Snail蛋白表达(P＜0.05),上调E-Cadherin蛋白表达(P＜0.05),进而逆转TGF-β1诱导的EMT进程.结论 积雪草酸可抑制前列腺癌细胞DU145和PC-3增殖,并逆转TGF-β1诱导的前列腺癌细胞DU145的EMT进程,从而发挥其抗前列腺癌细胞侵袭、转移的作用.
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