【摘 要】
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目的 探讨体外诱导人骨髓间充质干细胞(hMSCs)向心肌样细胞分化过程中分化与凋亡的情况,为hMSCs临床移植治疗提供数据.方法 采用体外纯化、扩增后的第4代hMSCs,分3组在体外分别经0μmol/L、2.5μmol/L、5.0μmol/L 5-杂氮胞苷(5-Aza)诱导24 h后继续培养8周,相差显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞仪检测各组细胞周期及凋亡指数,应用RT-PCR技术分析肌球蛋白重
【机 构】
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230022,合肥市,安徽医科大学第一附属医院老年心血管科,230022,合肥市,安徽医科大学第一附属医院老年心血管科,安徽省立医院血液内科,安徽省立医院血液内科,230022,合肥市,安徽医科大学第
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目的 探讨体外诱导人骨髓间充质干细胞(hMSCs)向心肌样细胞分化过程中分化与凋亡的情况,为hMSCs临床移植治疗提供数据.方法 采用体外纯化、扩增后的第4代hMSCs,分3组在体外分别经0μmol/L、2.5μmol/L、5.0μmol/L 5-杂氮胞苷(5-Aza)诱导24 h后继续培养8周,相差显微镜下观察细胞形态变化,流式细胞仪检测各组细胞周期及凋亡指数,应用RT-PCR技术分析肌球蛋白重链(β-MHC)、肌钙蛋白T(cTNT)、凋亡相关基因(Bcl-2、Bax)的mRNA在分化过程中的动态表达.结果 hMSCs诱导后凋亡指数随诱导后培养时间增加,低浓度诱导组低于标准浓度诱导组,组间差异有统计学意义(P＜0.05),G0/G1期细胞比例诱导后较对照组显著减少(P＜0.05);β-MHC和CTNT在诱导后表达开始增强,在第6周时均达到高峰,第8周时表达开始衰减,Bcl-2、Bax基因表达呈时间依赖性变化.结论 hMSCs在体外经纯化、扩增和诱导后可表现心肌样细胞的生物学特性,但诱导过程中hMSCs发生细胞凋亡,采用2.5 μmol/L 5-Aza低浓度诱导可减少细胞凋亡发生。
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