【摘 要】
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为了成功构建多浪羊白细胞介素-8(IL-8)基因的表达载体并实现其表达,试验根据已发表的绵羊基因序列,在其保守区设计引物,采用RT-PCR方法从多浪羊的外周血淋巴细胞中扩增得到I
【机 构】
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塔里木大学生命科学学院; 塔里木大学动物科学学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(30960277)
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为了成功构建多浪羊白细胞介素-8(IL-8)基因的表达载体并实现其表达,试验根据已发表的绵羊基因序列,在其保守区设计引物,采用RT-PCR方法从多浪羊的外周血淋巴细胞中扩增得到IL-8蛋白基因,此基因的大小为718 bp,经序列比对确定为多浪羊IL-8基因的全编码序列,通过DNA重组技术,将克隆后的IL-8基因质粒转入大肠杆菌,以SalⅠ和XhoⅠ酶切鉴定重组子,以IPTG诱导融合蛋白的表达。结果表明:经SDS-PAGE电泳检测发现,已将IL-8基因定向克隆至原核表达载体BL21(DE3)中,其产物的大小与预期大小相一致,为32.0 ku。说明已成功构建并表达多浪羊IL-8的菌株,并获得了纯化重组多浪羊蛋白。
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