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目的:研究E1A激活基因阻遏子蛋白(CREG)在依托泊苷(VP-16)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡中的作用及其调控机制。方法:将体外培养的原代HUVECs用pLNCX-CREG和pLXSN-shRNA-CREG反转录病毒真核表达载体分别转染,通过G418(800 mg/L)和嘌呤霉素(2.5 mg/L)筛选分别获得CREG过表达组HUVECs(H-C)和CREG低表达组HUVECs(H-S)。在H-C、HUVECs(H)和H-S3种细胞模型中加入凋亡诱导剂VP-16(100μmol/L,6 h),用TUNEL法和流式细胞术检测细胞的凋亡情况;用Western blotting检测细胞中磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)的蛋白表达量;应用p38特异性抑制剂SB203580(20μmol/L)预处理H-S细胞后,检测VP-16刺激诱导的细胞凋亡情况。结果:HUVECs经pLNCX-CREG和pLXSN-shRNA-CREG反转录病毒真核表达载体转染获得稳定的细胞克隆。经Western blotting证实,与HUVECs对照比较,H-C组细胞CREG表达明显增加至160%,而H-S组细胞中的CREG表达下降约70%。加入凋亡诱导剂VP-16(100μmol/L,6 h)后,TUNEL和流式双荧光染色检测结果均提示H-S中的细胞凋亡率明显升高,而H-C组细胞凋亡率较HUVECs对照组明显降低,两者具有显著差异。进一步应用Western blotting分析显示经VP-16刺激后,H-S细胞中p-p38蛋白表达较HUVECs和H-C组细胞显著增加;在H-S中添加SB203580(20μmol/L)后,VP-16诱导的细胞凋亡现象被显著抑制。结论:CREG过表达可能通过抑制p38 MAPK的激活阻遏VP-16诱导的HU-VECs凋亡。