【摘 要】
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目的 利用HPLC建立地衣芽孢杆菌活菌制剂中芽孢数的快速检测方法.方法 采用HPLC,以Waters Xbridge C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)、采用0.1％磷酸溶液-甲醇(92∶8)为流动相洗
【机 构】
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浙江大学药物生物技术研究所,杭州310058;浙江绍兴市市场监督管理局,浙江绍兴312000;浙江省食品药品检验研究院,杭州310052
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目的 利用HPLC建立地衣芽孢杆菌活菌制剂中芽孢数的快速检测方法.方法 采用HPLC,以Waters Xbridge C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)、采用0.1％磷酸溶液-甲醇(92∶8)为流动相洗脱、柱温30℃、检测波长273 nm、流速0.8 mL·min-1,建立地衣芽孢杆菌中2,6-吡啶二羧酸(DPA)含量的测定方法.以平板计数法对相应的芽孢悬液中芽孢数量进行统计,建立DPA浓度与芽孢数之间的关系曲线.同时检测3种地衣芽孢杆菌活菌制剂(片剂、胶囊剂和颗粒剂)的芽孢数.结果 建立的检测方法稳定性、精密度、重复性、加样回收率均良好,DPA线性关系良好,线性范围为2.5～80 mg·L-1(r=0.999),平均回收率为102.3％(n=9);芽孢最终浓度与DPA浓度呈线性关系,芽孢最终浓度线性范围为6.5× 108～7.8× 109 CFU·mL-1(r=0.993).同时检测3种地衣芽孢杆菌活菌制剂(片剂、胶囊剂和颗粒剂)的芽孢数,结果无显著性差异.结论 建立地衣芽孢杆菌活菌制剂中芽孢数的快速检测方法,效果好、简单、快速.
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