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目的
研究lncRNA NEAT1在Randall钙斑中的表达水平以及lncRNA NEAT1在钙离子诱导的人肾近端小管上皮细胞(HK-2细胞)中成骨样分化的分子机制。
方法通过应用Real-time PCR和Western blot来检测肾结石患者Randall钙斑组织和正常肾乳头组织成骨蛋白(BMP-2、OCN)以及lncRNA NEAT1的mRNA表达水平。体外培养HK-2细胞，将其分为对照组、10 mmol钙离子组、20 mmol钙离子组，各组细胞培养至第15天时，采用细胞茜素红钙染色液对细胞进行染色，观察各组细胞钙结节形成的表达情况。采用Real-time PCR和Western blot检测各组细胞lncRNA NEAT1及成骨蛋白的mRNA表达水平。
结果lncRNA NEAT1和成骨蛋白在Randall钙斑组织中显著高表达。细胞染色结果发现不同浓度的钙离子组均可以见到明显被染成红色的钙结节，且lncRNA NEAT1和成骨蛋白的mRNA表达呈钙离子浓度依赖性升高(P<0.05)。
结论在体外培养的环境下，HK-2细胞可以在高钙离子的刺激作用下发生成骨分化。lncRNA NEAT1可能通过参与钙离子诱导HK-2成骨样分化调控Randall钙斑形成。