探讨门静脉压力变化在肝淤血对大范围肝切除术后肝功能损害的作用。
方法采用实验研究方法。90只SD大鼠按照随机数字表法分为3组：非淤血组、淤血组和淤血＋脾切除组，每组30只大鼠。非淤血组大鼠行70%肝脏(中叶＋左叶)切除；淤血组大鼠行70%肝脏(中叶＋左叶)切除，结扎肝尾状叶静脉使尾状叶淤血(淤血体积占剩余肝脏体积约1/3)；淤血＋脾切除组大鼠行70%肝脏(中叶＋左叶)切除，结扎肝尾状叶静脉使尾状叶淤血，再切除脾脏。(1)每组20只大鼠用于术后生存分析。每组10只大鼠用于实验，术后12、24 h两个时间点各取5只大鼠用于门静脉压力测定，压力测定完毕以后，抽取血液，采集肝脏标本。(2)门静脉压力测定：检测术后12、24 h门静脉压力变化情况。(3)临床生化检测：检测术后12、24 h TBil水平变化情况。(4)病理学检查：通过肝组织切片HE染色了解肝脏病理损害。(5)免疫组织化学染色检测：检测表达CD68的巨噬细胞。(6)Western blot检测：检测术后24 h Cleaved Casepase-3、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白相对表达量。(7)RT-PCR检测：检测术后12、24 h血管调节相关基因[内皮素－1(ET-1)、内皮一氧化氮合酶(eNOS)]、炎症因子(TNF-α、IL-6)的mRNA相对表达量。(8)ELISA检测：检测术后12、24 h透明质酸变化情况。正态分布的计量资料以
±s表示，组间比较采用方差分析，两两比较采用LSD检验。采用Kaplan-Meier法绘制大鼠术后5 d生存曲线，生存情况比较采用Log-rank检验。
(1)生存分析：非淤血组、淤血组、淤血＋脾切除组大鼠术后5 d生存率分别为75%、10%和55%，3组大鼠生存率比较，差异有统计学意义(χ2＝18.21，P<0.05)。(2)门静脉压力和TBil水平变化情况：术后12 h非淤血组、淤血组和淤血＋脾切除组大鼠门静脉压力分别为(15.77±0.67)cmH2O(1 cmH2O＝0.098 kPa)、(18.33±0.28)cmH2O和(14.87±0.58)cmH2O，术后24 h分别为(13.49±0.45)cmH2O、(16.96±0.82)cmH2O和(15.69±0.85)cmH2O，3组大鼠12、24 h门静脉压力比较，差异均有统计学意义(F＝56.53，29.01，P<0.05)。非淤血组、淤血组和淤血＋脾切除组大鼠术后12 h TBil分别为(1.48±0.10)μmol/L、(1.76±0.15)μmol/L和(1.62±0.11)μmol/L，术后24 h分别为(1.47±0.11)μmol/L、(1.94±0.07)μmol/L和(1.67±0.11)μmol/L，3组大鼠术后12、24 h TBil比较，差异均有统计学意义(F＝6.81，27.85，P<0.05)。(3)病理学检查结果：与非淤血组大鼠比较，术后24 h淤血组大鼠未淤血的肝组织出现大量空泡样变性细胞，肝细胞肿胀严重，肝窦拥挤；与淤血组大鼠比较，淤血＋脾切除组大鼠未淤血的肝组织空泡样变性有一定改善。(4)免疫组织化学染色检测结果：与非淤血组大鼠比较，术后24 h淤血组大鼠未淤血的肝脏CD68阳性标记巨噬细胞增多；与淤血组大鼠比较，淤血＋脾切除组大鼠未淤血的肝脏CD68阳性标记巨噬细胞减少。(5)Western blot检测结果：非淤血组、淤血组和淤血＋脾切除组大鼠Cleaved Casepase-3蛋白相对表达量分别为0.63±0.05、1.17±0.18和0.95±0.17，3组大鼠比较，差异有统计学意义(F＝17.42，P<0.05)；非淤血组、淤血组和淤血＋脾切除组大鼠HIF-1α蛋白相对表达量分别为0.63±0.14、1.48±0.08和1.13±0.17，3组大鼠比较，差异有统计学意义(F＝50.58，P<0.05)。(6)RT-PCR检测结果：非淤血组、淤血组和淤血＋脾切除组大鼠术后12 h ET-1/eNOS分别为1.01±0.63、2.09±0.27和0.82±0.12，术后24 h分别为0.73±0.17、2.16±0.94、0.80±0.24，3组大鼠术后12、24 h ET-1/eNOS比较，差异均有统计学意义(F＝62.91，10.65，P<0.05)；非淤血组、淤血组和淤血＋脾切除组大鼠术后12 h TNF-α分别为0.99±0.08、127.80±13.15和7.34±1.56，术后24 h分别为0.99±0.06、116.62±13.32和58.62±12.12，3组大鼠术后12、24 h TNF-α比较，差异均有统计学意义(F＝436.77，154.54，P<0.05)；非淤血组、淤血组和淤血＋脾切除组大鼠术后12 h IL-6分别为0.98±0.06、1.87±0.34和1.54±0.15，术后24 h分别为0.99±0.05、2.02±0.27和1.51±0.11，3组大鼠术后12、24 h IL-6比较，差异均有统计学意义(F＝22.08，46.71，P<0.05)。(7)ELISA检测结果：非淤血组、淤血组和淤血＋脾切除组大鼠术后12 h透明质酸水平分别为(149±9)ng/L、(200±19)ng/L和(174±9)ng/L，术后24 h分别为(136±16)ng/L、(202±13)ng/L和(91±11)ng/L，3组大鼠术后12、24 h透明质酸水平比较，差异均有统计学意义(F＝19.23，34.68，P<0.05)。
结论在大范围肝切除的基础上，较大范围的肝淤血通过进一步升高门静脉压力导致肝脏微循环紊乱、组织缺氧、炎症、剩余未淤血肝细胞空泡样变性、细胞凋亡增加、肝功能受损加重、大鼠病死率增加，脾切除可以降低门静脉压力从而改善肝淤血造成的肝组织损伤，提高大鼠生存率。