应用多重PCR方法检测大肠埃希菌O157:H7的初步研究

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目的研究一种快速、特异的检测大肠埃希菌(以下称大肠杆菌)O157:H7的复合PCR方法。方法选用针对大肠杆菌O157:H7志贺样毒素Ⅰ、Ⅱ(SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ)和溶血素(Hly)基因的三对引物,在同一扩增体系中进行PCR,检测12株不同来源的O157:H7大肠杆菌及其它致病性大肠杆菌及沙门菌、志贺菌15株。结果除质粒缺失株(933)外,其余11株O157:H7大肠杆菌均在361bp处有溶血素基因产物出现;而12株O157:H7大肠杆菌扩增后的两条志贺样毒素基因产物存在差异,其中6株在210bp、484bp处出现两条相应产物,3株仅有210bp一条SLT-Ⅰ基因产物,另3株仅有484bp的SLT-Ⅱ基因产物。其它致病性大肠杆菌及沙门菌、志贺菌的扩增结果均为阴性。结论本复合PCR方法具有较高的特异性,可迅速、有效地将O157:H7大肠杆菌与其它常见致病性大肠杆菌及沙门菌、志贺菌相鉴别,通过进一步研究有望应用于临床大肠杆菌O157:H7感染的辅助诊断。
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