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目的:本试验旨在研究比较猪体细胞克隆胚胎体外发育与凋亡变化规律,探讨其体外发育潜能与细胞凋亡间的关系。
方法:将体外成熟培养获得的猪MⅡ期卵母细胞随机分为2组,分别进行体细胞核移植(SNCT)与体外受精(IVF)处理,采用彗星试验(Comet Assay)和Real-timeRT-PCR技术对体外发育过程中各时期胚胎的细胞凋亡事件及抗凋亡基因Bcl-2 mRNA表达水平进行研究。
结果:结果表明,虽然在卵裂率上无显著差异(77.6%对80.3%,P>0.05),但在囊胚发育率上,SCNT组胚胎明显低于IVF组,但无统计学差异(18.9%对24.5%;P>0.05);随着胚胎发育,SCNT与IVF胚胎的凋亡率均呈现不断增加的趋势,Bcl-2 mRNA表达量则逐渐下降;到16-cell以后,SCNT胚胎的凋亡率均显著高于IVF组,同时Bcl-2 mRNA表达量均显著低于IVF组(P<0.05)。
结论:本实验结果表明,猪克隆胚胎生产效率低下可能与胚胎发育过程中的细胞凋亡有关。