【摘 要】
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为提高嗜热地衣芽孢杆菌SR01葡聚糖酶的热稳定性,对其相关的氨基酸残基进行定点突变改造。通过对其结构的分析,构建了Y93S突变体,利用分子动力学模拟分析评估后,发现Y93S突变
【机 构】
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广西科技大学生物与化学工程学院,广西糖资源绿色加工重点实验室,广西高校糖资源加工重点实验室,柳州市鱼家乐饲料有限公司
【基金项目】
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广西科学基金(2015GXNSFBA139068);广西柳州市中小企业创新基金(2014F030618)
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为提高嗜热地衣芽孢杆菌SR01葡聚糖酶的热稳定性,对其相关的氨基酸残基进行定点突变改造。通过对其结构的分析,构建了Y93S突变体,利用分子动力学模拟分析评估后,发现Y93S突变体可能具有较高的耐热能力,利用定点突变技术构建Y93S表达载体并分析温度对表达产物酶活的影响。试验结果表明,突变酶Y93S的最适温度由野生型酶的55℃提高至70℃;在90℃条件下,突变酶Y93S较野生型酶的半衰期由60 min提高到120 min以上;pH及p H稳定性较野生型变化不明显。突变酶Y93S极大的提高了野生型酶的热稳定性,具有潜在的工业应用价值,同时为葡聚糖酶的耐热机理提供有力依据。
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