【摘 要】
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为探究2019年山东省烟台市某大菱鲆Scophthalmus maximus养殖场出现的以腹水、体表及内脏出血为主要症状的疾病发病原因，通过平板划线法从患病濒死大菱鲆（体质量为350 g±5 g）肝、肾、脾和心等组织中分离获得1株优势菌，采用形态学观察，16S rRNA、gyr B基因和rpo B基因序列分析，PCR特异性引物扩增，以及人工回归感染试验等方法对优势菌进行鉴定，检测其毒力基因、耐药基
【基金项目】
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烟台市重点研发计划项目（2019MSGY127）； 山东省现代农业产业技术体系鱼类创新团队烟台综合试验站（SDAIT-12-10）；
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为探究2019年山东省烟台市某大菱鲆Scophthalmus maximus养殖场出现的以腹水、体表及内脏出血为主要症状的疾病发病原因，通过平板划线法从患病濒死大菱鲆（体质量为350 g±5 g）肝、肾、脾和心等组织中分离获得1株优势菌，采用形态学观察，16S rRNA、gyr B基因和rpo B基因序列分析，PCR特异性引物扩增，以及人工回归感染试验等方法对优势菌进行鉴定，检测其毒力基因、耐药基因携带情况，并采用纸片扩增法（K-B）检测分离株对10类23种抗生素的敏感性。结果表明:从患病鱼分离获得的菌株，生理生化特征为革兰氏阴性杆菌，赖氨酸、鸟氨酸和葡萄糖产酸等试验呈阳性，枸橼酸、精氨酸、蔗糖、甘露醇、苦杏仁苷、尿素、硝酸盐还原和氧化酶等试验呈阴性;经16S rRNA、gyr B基因、rpo B基因序列比对，以及爱德华氏菌特异性引物扩增等鉴定，确定其为杀鱼爱德华氏菌Edwardsiella piscicida;该菌的毒力基因型为fim A+-fim B+-fim C+-fim D+-esr B+-muk F+-kat B+-sod B+-cit C+-gad B+，耐药基因型为TEM+-ant （3″）-Ⅰ+-tet （A）+-mcr-1+-Sul2+-Sul3--oqx A-;将分离菌株制备成7.8×1010、7.8×10~9、7.8×10~8、7.8×10~7CFU/m L 4个浓度的菌悬液，腹腔注射健康大菱鲆，得到菌株对受试鱼的半致死浓度(LD50)为1.2×10~8CFU/m L;药敏试验显示，该菌株对磺胺类2种、多肽类2种和利福霉素类1种在内的5种抗生素类药物耐药;对β-内酰胺类5种、氨基糖苷类3种、喹诺酮类5种、大环内酯类1种、氯霉素类1种、四环素类2种和呋喃类1种在内的18种抗生素敏感。研究表明，本试验首次从大菱鲆上检出携带5种耐药基因的杀鱼爱德华氏菌，本研究结果为鱼源耐药性杀鱼爱德华氏菌的分子特性、致病机理和药物防治等研究提供了科学参考。
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