MiR-142-5p通过靶向作用IGF2BP3调控多柔比星诱导的肝癌细胞凋亡

来源 :中国肿瘤生物治疗杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:madeshabi
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目的:〖HT5"SS〗探讨miR1425p对多柔比星诱导的原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞凋亡的影响及其作用机制。〖HT5W〗方法:〖HT5"SS〗收集广西医科大学附属肿瘤医院88例HCC患者手术切除的癌组织及癌旁组织(距癌灶组织边缘2~5 cm)标本。采用实时荧光定量PCR 检测人HCC组织和癌旁组织、人正常肝细胞以及HCC细胞系中miR1425p 的表达量。向HCC细胞SMMC7721中转染miR1425p mimics,流式细胞术检测过表达miR1425p后SMMC7721细胞在多柔比星(doxorubicin)(1 μg/ml)诱导下凋亡的变化;生物信息学方法预测miR1425p可靶向结合胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(insulinlike growth factor 2 mRNAbinding protein 3, IGF2BP3)基因,并采用荧光素酶报告基因实验进行验证。采用实时荧光定量PCR及Western blotting检测过表达miR1425p的SMMC7721细胞中〖STBX〗IGF2BP3〖STBZ〗的mRNA及蛋白表达情况。〖HT5W〗结果:〖HT5"SS〗与癌旁组织和正常肝细胞相比,HCC组织 (-6.91±2.61 vs -11.59±2.59,P<0.01)和多种HCC细胞系中miR1425p呈明显低表达(均P<0.01);过表达miR1425p可显著促进多柔比星诱导的HCC细胞SMMC7721的凋亡[(49.40±3.47)% vs (19.50±174)%,P<0. 01];过表达miR1425p可明显降低HCC细胞中〖STBX〗IGF2BP3〖STBZ〗的mRNA及蛋白表达水平(P<0.01),敲减〖STBX〗IGF2BP3〖STBZ〗表达可进一步促进多柔比星诱导的SMMC7721细胞的凋亡(P<0.01)。荧光素酶报告基因实验结果显示,miR1425p能够抑制〖STBX〗IGF2BP3〖STBZ〗的3′UTR荧光素酶报告基因的活性。〖HT5W〗结论:〖HT5"SS〗miR1425p在HCC组织标本和体外培养细胞系中的表达水平均显著降低,转染miR1425p mimics后能够促进多柔比星诱导的HCC细胞的凋亡,其机制可能与miR1425p靶向作用〖STBX〗IGF2BP3〖STBZ〗从而促进HCC细胞凋亡有关。
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