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本研究旨在探究根皮素（PT）对过氧化氢（H2O2）诱导的牛脂肪源性干细胞（ADSCs）氧化应激和凋亡的影响。试验选取牛脂肪组织，使用Ⅳ型胶原酶分离牛ADSCs，传代培养后利用免疫荧光对牛ADSCs表面标记蛋白CD29、CD44、CD73及Vimentin进行鉴定。用不同浓度（0、100、200、500、1 000μmol/L）的过氧化氢（H2O2）处理牛ADSCs 24 h，通过CCK-8法检测细胞存活率，筛选构建牛ADSCs氧化应激模型的适宜H2O2浓度。利用CCK-8法检测不同浓度（0、10、50、100μmol/L） PT作用4 h后牛ADSCs的存活率，确定PT对牛ADSCs进行预保护的适宜浓度。随后先用不同浓度（0、10、50μmol/L） PT预处理牛ADSCs 4 h，对牛ADSCs进行预保护;再利用500μmol/L H2O2处理牛ADSCs 24 h。采用试剂盒检测牛ADSCs内氧化应激相关指标，包括丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性;荧光探针2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）测定细胞内活性氧（ROS）含量;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测细胞凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白（Bax）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）及半胱天冬酶-3（Caspase-3）mRNA相对表达量。结果显示:500μmol/L的H2O2能引起牛ADSCs存活率极显著下降（P<0.01），可以用来诱导其发生氧化应激。10和50μmol/L的PT不会对牛ADSCs的存活率产生显著影响（P>0.05），而100μmol/L的PT会引起牛ADSCs的存活率显著下降（P<0.05），因此后续试验选用10、50μmol/L的PT处理牛ADSCs进行4 h的预保护。免疫荧光检测结果显示，牛ADSCs中CD29、CD44、CD73及Vimentin蛋白表达呈阳性;氧化应激相关指标检测结果显示，与空白组（0μmol/L PT预保护，0μmol/L H2O2处理）相比，500μmol/L H2O2极显著增加牛ADSCs内MDA含量（P<0.01），极显著降低牛ADSCs内SOD活性（P<0.01），说明500μmol/L H2O2处理牛ADSCs引起了氧化应激。与氧化应激组（0μmol/L PT预保护，500μmol/L H2O2处理）相比，10或50μmol/L PT与500μmol/L H2O2共处理可以显著减少牛ADSCs内MDA含量（P<0.05）,50μmol/L PT与500μmol/L H2O2共处理可以显著增加牛ADSCs内SOD活性（P<0.05），说明适宜浓度的PT可以缓解H2O2诱导的牛ADSCs氧化应激。ROS染色结果显示，10、50μmol/L PTT与500μmol/L H2O2共处理均可极显著降低牛ADSCs内ROS含量（P<0.01），同样说明适宜浓度的PT可以缓解H2O2诱导的牛ADSCs氧化应激。此外，qRT-PCR检测结果显示，与空白组相比，500μmol/L H2O2显著增加牛ADSCs内促凋亡基因Bax和Caspase-3 mRNA相对表达量（P<0.0 5），极显著减少牛ADSCs内抗凋亡基因Bcl-2 mRNA相对表达量（P<0.01），说明500μmol/L H2O2处理可以引起牛ADSCs凋亡。而10或50μmol/L PT与500μmol/L H2O2共处理时，牛ADSCs内凋亡相关基因mRNA相对表达量与氧化应激组没有显著差异（P>0.05），说明在本试验的条件下，PT不会缓解H2O2诱导的牛ADSCs凋亡。综上所述，适量的PT可以有效缓解H2O2诱导的牛ADSCs氧化应激。