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目的
比较胶质瘤中异柠檬酸脱氢酶-1(IDH1)不同检测方法的优缺点，优化免疫组化染色的检测条件。
方法收集南方医科大学南方医院外科自2013年1月至12月手术切除且经病理确诊的胶质瘤标本138例，其中WHO分级Ⅰ级18例、Ⅱ级49例、Ⅲ级24例、Ⅳ级47例。采用手工免疫组化染色和全自动免疫组化染色检测胶质瘤IDH1蛋白的表达；应用聚合酶链反应-高分辨率熔解曲线分析法(PCR-HRM)对结果进行验证。
结果手工免疫组化染色显示IDH1表达阴性97例，阳性41例，阳性病例中有65.9％的病例阳性细胞百分比大于75%，70.7％的病例IDH1染色强度为强着色。手工免疫组化染色背景干净、清晰，容易判读，不存在判读困难和假阳性的病例；全自动免疫组化仪染色结果背景偏深，易出现判读困难和假阳性现象。手工免疫组化和全自动免疫组化仪的检测结果不同，全自动免疫组化仪的阳性检测率较高，差异有统计学意义(χ2= 22.042，P= 0.000)。手工免疫组化染色和PCR-HRM法检测结果一致，阳性检测率的差异无统计学意义(χ2=0.800，P=0.371)。
结论在IDH1免疫组化检测中，手工免疫组化染色结果较全自动免疫组化仪染色结果准确。经PCR-HRM法验证，IDH1基因突变与阳性肿瘤细胞数有关，而与染色强度无关。定位准确、肯定的阳性肿瘤细胞数量>5％即可判定该病例IDH1基因发生突变。