【摘 要】
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用PCR方法扩增黄瓜花叶病毒部分复制酶基因（CMV△Rep），连接到PUCm-T载体上构建成克隆载体PUCm-T-CMV△Rep。用BamHⅠ和SalⅠ分别对克隆载体PUCm-T-CMV△Rep和植物表达载体pBIN43
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用PCR方法扩增黄瓜花叶病毒部分复制酶基因（CMV△Rep），连接到PUCm-T载体上构建成克隆载体PUCm-T-CMV△Rep。用BamHⅠ和SalⅠ分别对克隆载体PUCm-T-CMV△Rep和植物表达载体pBIN438进行双酶切，获得目的片段和线性质粒。在T4 DNA连接酶的作用下进行定向连接，构建成植物表达载体pBIN438-CMV△Rep。采用CaCl2冻融法将重组子导入根癌农杆菌LBA4404。经PCR和双酶切鉴定，表明重组质粒pBIN438-CMV△Rep已成功导入根癌农杆菌中。
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