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本文设计并化学合成了一对PCR引物,以人CD4 cDNA为模板,成功地扩增出人CD4 N端两个结构域的编码基因(600bp),并在此基因两端分别插入了EcoRI和Hind Ⅲ酶切位点及起始和终止码。通过EcoRI和Hind Ⅲ双酶切位点将CD4基因克隆入pUC19质粒,经过PCR和酶切鉴定得到CD4重组克隆pT403。DNA序列分析结果表明,所克隆CD4基因与已发表的人CD4基因序列完全一致。将CD4基因片段插入pSM43获得重组表达质粒pT416,温度诱导2h以上,观察到CD4基因的表达产物,其分子量约为24000,与预期表达产物大小一致。凝胶扫描分析结果表明,所表达CD4蛋白占细菌总蛋白的24.8%,经初步纯化,CD4表达产物的纯度达到92%。