【摘 要】
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目的探讨筛选人退变腰椎间盘特异性表达microRNA靶基因JNK信号转导通路在椎间盘退变过程中的分子生物学机制。方法选取腰椎退行性疾病患者10例为研究组,术中均切除退变髓核组
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目的探讨筛选人退变腰椎间盘特异性表达microRNA靶基因JNK信号转导通路在椎间盘退变过程中的分子生物学机制。方法选取腰椎退行性疾病患者10例为研究组,术中均切除退变髓核组织块。选取腰椎爆裂性骨折接受前路减压髓核切除术患者4例为对照组,术中均切除正常髓核组织块。收集到的髓核组织分别进行髓核细胞分离、培养、鉴定,并提取总RNA;使用microRNA微阵列芯片方法筛选得到差异表达的microRNA,采用实时q PCR技术验证其中高表达者,采用Targetscan6.2软件进行靶基因预测,并分析靶基因和差异表达基因功能明显相关的信号通路;定量PCR方法对筛选的结果进行验证。结果在人退变腰椎间盘组织中microRNA.494和microRNA.513a.5p呈明显的高表达,比值分别为2.8351、2.1157,与验证结果一致。预测靶基因分别为MKK4、Jun D,分别处于JNK信号通路的上游和下游,参与JNK信号传导。结论 microRNA.494和microRNA.513a.5p在人退变腰椎间盘中高表达,相应的靶基因为MKK4、Jun D;JNK信号转导通路在人退变腰椎间盘发病机制中发挥关键的正负反馈调节作用。
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